HiMedia KB001-5KT Биохимический тест-набор HiIMViC (5 наборов)

Биохимический тест-набор HiIMViC HiMedia KB001-5KT (5 наборов) представляет собой стандартизированную колориметрическую систему из 12 тестов для идентификации и дифференциации видов Enterobacteriaceae. Набор предназначен для работы с чистыми изолятами грамотрицательных, оксидаза-отрицательных и нитрат-положительных палочек, часто выделяемых из клинических и неклинических образцов.

Принцип измерения

Работа системы основана на определении способности микроорганизмов к утилизации конкретных субстратов и изменении pH среды. В процессе инкубации метаболические изменения приводят к изменению цвета среды, которое фиксируется либо спонтанно, либо после добавления специфических реагентов.

Область применения

Набор используется для идентификации видов семейства Enterobacteriaceae по чистым культурам, полученным из клинических и неклинических проб.

Комплект поставки

1. Стерильные среды в лунках для проведения 12 тестов (индол, метиловый красный, Фогеса-Проскауэра, утилизация цитрата и 8 углеводов: глюкоза, адонит, арабиноза, лактоза, сорбитол, маннит, рамноза, сахароза).
2. Технический вкладыш.
3. Индекс идентификации.
4. Реагент Ковакса (R008) для теста на индол.
5. Индикатор метилового красного (I007) для MR-теста.
6. Реагент Баритта А (R029) для VP-теста.
7. Реагент Баритта B (R030) для VP-теста.
8. Таблица интерпретации результатов и лист регистрации данных.

Подготовка и проведение анализа

Подготовка инокулята

1. Выделите исследуемый микроорганизм на стандартной среде, например, питательном агаре (M001) или агаре с триптоном и соей (M290).
2. Перенесите одну изолированную колонию в 5 мл бульона BHI (M210) и инкубируйте при 35–37 °C в течение 4–6 часов до достижения оптической плотности 0,1 OD при 620 нм (соответствует стандарту МакФарланда 0,5). При необходимости увеличьте время инкубации до достижения указанной плотности.
3. Альтернативный метод: создайте гомогенную суспензию из 1–3 изолированных колоний в 2–3 мл стерильного физраствора до достижения плотности 0,1 OD при 620 нм.

Инокуляция и инкубация

1. В асептических условиях откройте набор и снимите защитную фольгу.
2. Внесите по 50 мкл подготовленного инокулята в каждую лунку методом поверхностного нанесения.
3. Допустим альтернативный метод: инокуляция каждой лунки путем прокалывания петлей с инокулятом.
4. Инкубируйте при температуре 35–37 °C в течение 18–24 часов.

Интерпретация результатов

Добавление реагентов в лунки № 1, 2 и 3 производится строго по окончании периода инкубации (через 18–24 часа).

Оценка тестов

• Тест на индол (лунка № 1): Добавьте 2–3 капли реагента Ковакса (R008). Положительный результат — появление розово-красного кольца. Отсутствие кольца — отрицательный результат.
• Тест с метиловым красным (лунка № 2): Добавьте 2–3 капли индикатора метилового красного (I007). Положительный результат — красный цвет. Желто-оранжевый цвет — отрицательный результат.
• Тест Фогеса-Проскауэра (лунка № 3): Добавьте 2–3 капли реагента Баритта А (R029) и 1 каплю реагента Баритта B (R030). Положительный результат — развитие розово-красного окрашивания через 5–10 минут. Отсутствие изменения цвета или медный цвет — отрицательный результат.
• Тест на утилизацию цитрата (лунка № 4): Положительный результат — изменение цвета на синий. Зеленый цвет или отсутствие изменений — отрицательный результат.
• Тесты на утилизацию углеводов (лунки № 5–12): Положительный результат — изменение цвета на желтый. Красный цвет или отсутствие изменений — отрицательный результат.

Сводная таблица интерпретации

Индекс идентификации видов Enterobacteriaceae