HiMedia KB001-5KT Биохимический тест-набор HiIMViC (5 наборов)

Биохимический тест-набор HiMedia KB001-5KT Биохимический тест-набор HiIMViC (5 наборов) — стандартизированная колориметрическая система идентификации по 12 биохимическим тестам. Набор предназначен для идентификации и дифференциации видов Enterobacteriaceae по чистой изолированной культуре с ограничением применения непосредственно к клиническим образцам.

Назначение

KB001 — стандартизированная колориметрическая система идентификации, включающая 12 традиционных биохимических тестов для идентификации и дифференциации видов Enterobacteriaceae с использованием чистого изолята.

Организмы, относящиеся к семейству Enterobacteriaceae, являются грамотрицательными, оксидазоотрицательными, нитратположительными палочками и часто выделяются из клинических и не клинических образцов.

Тип образца: чистый изолят из клинического или не клинического образца.

Принцип измерения

Тест-набор основан на изменении pH и утилизации субстрата. При инкубации микроорганизмы претерпевают метаболические изменения, которые проявляются изменением цвета среды; изменение может быть видимым непосредственно или возникать после добавления реагента.

В набор входят четыре теста с добавлением реагентов и восемь тестов утилизации углеводов:

• индольный тест;
• тест с метиловым красным;
• тест Фогеса—Проскауэра;
• тест на утилизацию цитрата;
• утилизация глюкозы;
• утилизация адонитола;
• утилизация арабинозы;
• утилизация лактозы;
• утилизация сорбитола;
• утилизация маннита;
• утилизация рамнозы;
• утилизация сахарозы.

Состав набора

Каждый набор содержит 5 тест-наборов KB001, рассчитанных на проведение 5 тестов. Каждый тест-набор включает стерильные среды для 12 исследований:

1. Индольный тест.
2. Тест с метиловым красным.
3. Тест Фогеса—Проскауэра.
4. Тест на утилизацию цитрата.
5. Глюкоза.
6. Адонитол.
7. Арабиноза.
8. Лактоза.
9. Сорбитол.
10. Маннитол.
11. Рамноза.
12. Сахароза.

Комплектация:

1. 5 тест-наборов KB001, достаточных для выполнения 5 тестов.
2. Техническая инструкция к продукту.
3. Индекс идентификации.
4. Реагент Ковача (R008) для индольного теста.
5. Индикатор метилового красного (1007) для теста с метиловым красным.
6. Реагент Баритта A (R029) для теста Фогеса—Проскауэра.
7. Реагент Баритта B (R030) для теста Фогеса—Проскауэра.
8. Таблица интерпретации результатов и лист регистрации результатов.

Материалы, необходимые, но не входящие в комплект

• стандарт Мак-Фарланда;
• инокуляционные петли;
• пипетки;
• обогатительная среда или среда для выделения культуры.

Методика проведения анализа

Подготовка инокулята

1. Выделите идентифицируемый микроорганизм на стандартной среде, например на питательном агаре (M001) или соево-пептонном агаре с триптоном (M290).
2. Отберите одну изолированную колонию, внесите её в 5 мл бульона для сердечно-мозговой инфузии (BHI, M210) и инкубируйте при 35–37 °C в течение 4–6 ч, пока мутность инокулята не достигнет 0,1 оптической плотности при 620 нм или стандарта Мак-Фарланда 0,5. Для некоторых микроорганизмов может потребоваться инкубация более 6 ч. В этом случае инкубируйте до достижения мутности инокулята 0,1 оптической плотности при 620 нм.
3. Альтернативный способ подготовки инокулята: отберите 1–3 хорошо изолированные колонии и приготовьте однородную суспензию в 2–3 мл стерильного физиологического раствора. Плотность суспензии должна соответствовать 0,1 оптической плотности при 620 нм.

Инокуляция тест-набора

1. Вскройте тест-набор в асептических условиях. Снимите герметизирующую фольгу.
2. Внесите в каждую лунку по 50 мкл подготовленного инокулята методом поверхностной инокуляции.
3. Альтернативно тест-набор можно инокулировать прокалыванием каждой отдельной лунки инокуляционной петлёй с инокулятом.

Инкубация

• Температура инкубации: 35–37 °C.
• Продолжительность инкубации: 18–24 ч.

Интерпретация результатов

Интерпретируйте результаты в соответствии с критериями, приведёнными в индексе идентификации.

Реагенты в лунки № 1, 2 и 3 добавляйте в конце периода инкубации, то есть после 18–24 ч.

Контроль качества

Внешний вид

Стерильная белая непрозрачная полоска с 12 лунками, содержащими среды для:

1. индольного теста;
2. теста с метиловым красным;
3. теста Фогеса—Проскауэра;
4. теста на утилизацию цитрата;
5. утилизации глюкозы;
6. утилизации адонитола;
7. утилизации арабинозы;
8. утилизации лактозы;
9. утилизации сорбитола;
10. утилизации маннита;
11. утилизации рамнозы;
12. утилизации сахарозы.

Количество среды

Количество среды в каждой лунке: 0,8 мл.

Проверка стерильности

Результат: соответствует критериям выпуска.

Интерпретация результатов по отдельным лункам

Реагенты в лунки № 1, 2 и 3 добавляйте в конце периода инкубации, то есть после 18–24 ч.

1. Индольный тест: лунка № 1

   • Добавьте 2–3 капли реагента Ковача (R008).
   • Положительная реакция: появление розовато-красного кольца.
   • Отсутствие красного кольца указывает на отрицательную реакцию.

2. Тест с метиловым красным: лунка № 2

   • Добавьте 2–3 капли индикатора метилового красного (I007).
   • Положительная реакция: появление красной окраски.
   • Желтовато-оранжевая окраска указывает на отрицательную реакцию.

3. Тест Фогеса—Проскауэра: лунка № 3

   • Добавьте 2–3 капли реагента Баритта A (R029) и 1 каплю реагента Баритта B (R030).
   • Положительная реакция: появление розовато-красной окраски через 5–10 мин.
   • Отсутствие изменения окраски или медная окраска, возникающая вследствие реакции реагентов A и B, указывает на отрицательную реакцию.

4. Тест на утилизацию цитрата: лунка № 4

   • Положительная реакция: изменение окраски на синюю.
   • Зелёная окраска или отсутствие изменения окраски указывает на отрицательную реакцию.

5. Тест на утилизацию углеводов: лунки № 5–12

   • Положительная реакция: изменение окраски на жёлтую.
   • Красная окраска или отсутствие изменения окраски указывает на отрицательную реакцию.

Таблица интерпретации результатов

Индекс идентификации видов Enterobacteriaceae

| Тест | Индол | Метиловый красный | Фогес