HiMedia KB001-20KT Биохимический тест-набор HiIMViC (20 наборов)

Биохимический тест-набор HiIMViC KB001-20KT производства HiMedia представляет собой стандартизированную колориметрическую систему из 12 тестов для идентификации и дифференциации видов семейства Enterobacteriaceae. Набор предназначен для работы с чистыми изолятами грам-отрицательных, оксидаза-отрицательных и нитрат-положительных палочек, выделяемых из клинических и неклинических образцов.

Принцип измерения

Идентификация основана на использовании двенадцати стандартных биохимических тестов, базирующихся на принципе изменения pH и утилизации субстратов. В процессе инкубации микроорганизмы подвергаются метаболическим изменениям, которые проявляются в виде изменения цвета среды. Цвет может измениться спонтанно или после добавления специфического реагента.

Область применения

Набор используется для дифференциации видов семейства Enterobacteriaceae при анализе чистых культур, полученных из клинических и неклинических проб. Не предназначен для прямого использования с клиническим материалом; предварительно требуется выделение микроорганизмов на соответствующих изоляционных средах.

Комплект поставки

В состав набора (на 20 тестов) входят:

• Стерильные среды в лунках для проведения тестов:
  • Индол;
  • Метиловый красный;
  • Фогеса-Проскауэра;
  • Утилизация цитрата;
  • 8 углеводов: глюкоза, адонит, арабиноза, лактоза, сорбитол, маннит, рамноза, сахароза.
• Реагенты:
  • Реагент Ковакса (R008) для теста на индол;
  • Индикатор метилового красного (I007) для MR-теста;
  • Реагент Барритта А (R029) для VP-теста;
  • Реагент Барритта B (R030) для VP-теста.
• Технический вкладыш.
• Индекс идентификации.
• Таблица интерпретации результатов и лист регистрации данных.

Дополнительно требуемые материалы (не входят в комплект)

• Стандарт МакФарланда;
• Инокуляционные петли, пипетки;
• Обогатительные или изоляционные среды.

Методика проведения анализа

Подготовка инокулята

1. Выделите целевой микроорганизм на общей среде, например, на питательном агаре (M001) или агаре с триптоном и соей (M290).
2. Перенесите одну изолированную колонию в 5 мл бульона BHI (M210) и инкубируйте при 35–37 °C в течение 4–6 часов до достижения мутности 0,1 OD при 620 нм или соответствия стандарту 0,5 по МакФарланду. При необходимости увеличьте время инкубации до достижения указанной плотности.
3. Альтернативный метод: создайте гомогенную суспензию из 1–3 изолированных колоний в 2–3 мл стерильного физиологического раствора до достижения плотности 0,1 OD при 620 нм.

Инокуляция набора

1. В асептических условиях откройте набор и снимите защитную фольгу.
2. Внесите по 50 мкл подготовленного инокулята в каждую лунку методом поверхностного посева.
3. Альтернативно возможен метод посева путем прокалывания каждой лунки петлей с инокулятом.

Инкубация

• Температура: 35–37 °C.
• Продолжительность: 18–24 часа.

Интерпретация результатов

Результаты оцениваются согласно индексу идентификации. Реагенты в лунки № 1, 2 и 3 добавляются строго по окончании периода инкубации (через 18–24 часа).

1. Тест на индол (лунка № 1): добавить 2–3 капли реагента Ковакса (R008). Положительный результат — появление розово-красного кольца.
2. Тест с метиловым красным (лунка № 2): добавить 2–3 капли индикатора метилового красного (I007). Положительный результат — красный цвет. Отрицательный — желтовато-оранжевый.
3. Тест Фогеса-Проскауэра (лунка № 3): добавить 2–3 капли реагента Барритта А (R029) и 1 каплю реагента Барритта B (R030). Положительный результат — появление розово-красного цвета через 5–10 минут. Отрицательный — отсутствие изменения цвета или медный оттенок.
4. Тест на цитрат (лунка № 4): положительный результат — изменение цвета на синий. Отрицательный — зеленый цвет или отсутствие изменений.
5. Тесты на утилизацию углеводов (лунки № 5–12): положительный результат — изменение цвета на желтый. Отрицательный — красный цвет или отсутствие изменений.

Технические характеристики

Параметры среды

• Объем среды в каждой лунке: 0,8 мл
• Внешний вид: стеричная белая непрозрачная полоска с 12 лунками
• Температура хранения при получении: 2–8 °C

Таблица интерпретации результатов

Индекс идентификации видов Enterobacteriaceae