HiMedia KB001-10KT Биохимический тест-набор HiIMViC (10 наборов)

Биохимический тест-набор HiIMViC HiMedia KB001-10KT (10 наборов) для идентификации и дифференциации видов Enterobacteriaceae. Система представляет собой стандартизированный колориметрический набор из 12 биохимических тестов, предназначенный для работы с чистыми изолятами.

Принцип измерения

Работа набора основана на принципе изменения pH среды и утилизации субстратов. В процессе инкубации микроорганизмы подвергаются метаболическим изменениям, которые проявляются в виде изменения цвета среды. Изменение цвета может происходить спонтанно или после добавления специфических реагентов.

Область применения

Набор используется для идентификации грамотрицательных, оксидазоотрицательных, нитратположительных палочек семейства Enterobacteriaceae, которые наиболее часто выделяются из клинических и неклинических образцов.

Состав набора

Каждый комплект (в зависимости от модификации на 5, 10 или 20 тестов) содержит:

• Стерильные среды в лунках для проведения 12 тестов:
  • Тесты на индол, метиловый красный, Фогеса-Проскауэра и утилизацию цитрата.
  • Тесты на утилизацию 8 углеводов: глюкозы, адонитола, арабинозы, лактозы, сорбитола, маннитола, рамнозы, сахарозы.
• Реагент Ковача (R008) для теста на индол.
• Индикатор метилового красного (1007) для MR-теста.
• Реагент Баритта А (R029) для VP-теста.
• Реагент Баритта B (R030) для VP-теста.
• Индекс идентификации.
• Таблица интерпретации результатов и лист записи данных.
• Технический вкладыш.

Дополнительно требуемые материалы (не входят в комплект)

• Стандарт МакФарланда.
• Инокуляционные петли, пипетки.
• Среды для обогащения или изоляции.

Методика проведения анализа

Подготовка инокулята

1. Изолируйте исследуемый организм на общей среде, например, на питательном агаре (M001) или триптон-соевом агаре (M290).
2. Перенесите одну изолированную колонию в 5 мл бульона BHI (M210) и инкубируйте при 35–37 °C в течение 4–6 часов до достижения мутности 0,1 OD при 620 нм или стандарта 0,5 по МакФарланду. При необходимости увеличьте время инкубации до достижения указанной оптической плотности.
3. Альтернативный метод: создайте гомогенную суспензию из 1–3 хорошо изолированных колоний в 2–3 мл стерильного физиологического раствора до достижения плотности 0,1 OD при 620 нм.

Инокуляция набора

1. В асептических условиях откройте набор и снимите защитную фольгу.
2. Внесите по 50 мкл подготовленного инокулята в каждую лунку методом поверхностного нанесения.
3. Допустим альтернативный метод: инокуляция каждой лунки путем «прокола» петлей с инокулятом.

Инкубация

• Температура: 35–37 °C.
• Продолжительность: 18–24 часа.

Интерпретация результатов

Добавление реагентов в лунки № 1, 2 и 3 производится строго по окончании периода инкубации (через 18–24 часа).

Оценка тестов

1. Тест на индол (лунка № 1): добавить 2–3 капли реагента Ковача (R008). Положительный результат — появление розово-красного кольца. Отсутствие кольца — отрицательный результат.
2. Тест на метиловый красный (лунка № 2): добавить 2–3 капли индикатора метилового красного (I007). Положительный результат — красный цвет. Желто-оранжевый цвет — отрицательный результат.
3. Тест Фогеса-Проскауэра (лунка № 3): добавить 2–3 капли реагента Баритта А (R029) и 1 каплю реагента Баритта B (R030). Положительный результат — появление розово-красного цвета через 5–10 минут. Отсутствие изменения цвета или медный оттенок — отрицательный результат.
4. Тест на цитрат (лунка № 4): положительный результат — изменение цвета на синий. Зелёный цвет или отсутствие изменений — отрицательный результат.
5. Тесты на утилизацию углеводов (лунки № 5–12): положительный результат — изменение цвета на жёлтый. Красный цвет или отсутствие изменений — отрицательный результат.

Сводная таблица интерпретации

Индекс идентификации видов Enterobacteriaceae