HiMedia K048-KT Набор для обнаружения ниацина, модифицированный без (1 набор)

Набор HiMedia K048-KT для обнаружения ниацина, модифицированный без шприца, предназначен для биохимической идентификации микобактерий по жёлтому окрашиванию реагентного раствора. Набор применяют с культурами микобактерий старше 3 недель, выращенными на скошенной среде Лёвенштейна—Йенсена с обильным ростом; культуры на других средах и смешанные культуры могут давать ложноотрицательный результат.

Назначение

Набор используется для обнаружения ниацина, накапливающегося в культурах микобактерий, и подтверждения Mycobacterium tuberculosis.

Идентификация изделия

Состав

Формула скорректирована и стандартизирована в соответствии с рабочими параметрами.

Принцип обнаружения и интерпретация

Mycobacterium tuberculosis, а также некоторые изоляты Mycobacterium simiae и Mycobacterium chelonae образуют ниацин в процессе роста. Эти штаммы не метаболизируют ниацин далее, поэтому ниацин накапливается и выделяется в агар или скошенную питательную среду. Набор для обнаружения ниацина выявляет накопленный ниацин и используется для подтверждения Mycobacterium tuberculosis.

Методика проведения анализа

Подготовка исследуемой пробы

1. Используйте только культуру микобактерий возрастом более 3 недель, выращенную на скошенной среде Лёвенштейна—Йенсена и демонстрирующую обильный рост. Культуры, выращенные на других типах питательных сред, не образуют достаточного количества ниацина для получения положительного результата этим методом.
2. Недостаточное количество микроорганизмов в культуре или выращивание культуры на среде, отличной от среды Лёвенштейна—Йенсена, может привести к ложноотрицательному результату. Не используйте тест для культур, смешанных с другими микобактериями.
3. Добавьте к скошенной среде 2 мл стерильной дистиллированной воды или физиологического раствора.
4. Разрежьте или проколите скошенную среду шпателем или иглой.
5. Проведите экстракцию одним из способов:
   • инкубируйте флакон в вертикальном положении при 37 °C в течение 2 ч на водяной бане;
   • либо оставьте флакон в горизонтальном положении на 20 мин при комнатной температуре;
   • либо поместите флакон в горизонтальном положении в автоклав при 121 °C на 30 мин для экстракции ниацина в дистиллированную воду.
6. Удерживайте скошенную среду в вертикальном положении в течение 5 мин.
7. Используйте 1 мл полученного раствора в качестве исследуемой пробы.

Для переноса растворов рекомендуется использовать шприцы вместимостью 1 мл.

Исследование пробы

1. Перенесите содержимое части A (1 мл) в часть B (1 мл). Полученный раствор используйте как реагентный раствор для дальнейшего анализа.
2. Перенесите 1 мл исследуемой пробы в реагентный раствор, состоящий из частей A и B, с помощью шприца.
3. Положительная реакция: появление жёлтого окрашивания в течение 5 мин.
4. Отрицательная реакция: отсутствие жёлтого окрашивания в течение 5 мин; реагентный раствор остаётся бесцветным.

Положительный контроль

1. Перенесите содержимое части A (1 мл) в часть B (1 мл). Полученный раствор используйте как реагентный раствор для дальнейшего анализа.
2. Перенесите 1 мл реагента P R055 в реагентный раствор, состоящий из частей A и B, с помощью шприца.
3. Наблюдайте появление жёлтого окрашивания в течение 5 мин.

Отрицательный контроль

1. Перенесите содержимое части A (1 мл) в часть B (1 мл). Полученный раствор используйте как реагентный раствор для дальнейшего анализа.
2. Перенесите 1 мл стерильной дистиллированной воды или физиологического раствора в реагентный раствор, состоящий из частей A и B, с помощью шприца.
3. Через 5 мин раствор должен оставаться бесцветным.

Меры предосторожности

1. Реагенты светочувствительны; не подвергайте их воздействию света.
2. Реагенты частей A и B токсичны и образуют ядовитый газ. Соблюдайте осторожность при работе. Рекомендуется закрывать ноздри защитной маской.
3. Не допускайте контакта реагентов с кислотами.
4. Часть A канцерогенна. Обращайтесь с ней осторожно, не вдыхайте пары и не допускайте контакта с кожей.
5. Перед утилизацией нейтрализуйте пробирки, добавив в каждую 10%-ный раствор NaOH.
6. Все работы выполняйте в боксе биологической безопасности.

Утилизация

Добавьте 10%-ный раствор NaOH во флаконы с каждым реагентом, после чего утилизируйте их автоклавированием или сжиганием.

Контроль качества

Внешний вид и комплектность набора

Каждый набор содержит:

• часть A: реагент (1 мл) — 10 флаконов;
• часть B: реагент (1 мл) — 10 флаконов;
• R055: реагент P (4 мл) — 1 флакон.

Цвет и прозрачность

Части A и B, а также реагент P R055 представляют собой прозрачные бесцветные растворы, не содержащие нерастворимых частиц.

Биохимический тест

Перенесите 1 мл реагента P R055 в реагентный раствор, состоящий из частей A и B, с помощью шприца. Наблюдайте появление жёлтого окрашивания в течение 5 мин.

Биохимический результат

• Образование жёлтого окрашивания в течение 5 мин.
• Отсутствие изменения окраски в течение 5 мин.
• Образование жёлтого окрашивания в течение 5 мин — положительная реакция.

Испытание на стерильность

Соответствует критериям выпуска.

Условия хранения и срок годности

• Температура хранения: 2–8 °C.
• Условие применения: использовать до истечения срока годности, указанного на этикетке.
• Условие при получении: 2–8 °C.

Технические характеристики

• Производитель: HiMedia
• Назначение изделия: питательная среда
• Код изделия: K048
• Формат: набор
• Модификация: без шприца