HiMedia K047-KT Набор для обнаружения ниацина, модифицированный с (1 набор)

Набор для обнаружения ниацина HiMedia K047-KT, модифицированный, предназначен для дифференциации видов Mycobacterium, в частности для предварительной идентификации Mycobacterium tuberculosis. Система позволяет определить накопление ниацина, который экскретируется бактериями в агар или на скос среды.

Принцип измерения

Mycobacterium tuberculosis, а также некоторые изоляты Mycobacterium simiae и Mycobacterium chelonae вырабатывают ниацин в процессе роста. Поскольку данные штаммы не метаболизируют ниацин далее, он накапливается и выделяется в среду (агар или скос). Набор K047-KT обнаруживает накопленный ниацин, что служит подтверждением наличия M. tuberculosis.

Область применения

Набор используется в микробиологических лабораториях для идентификации и дифференциации микобактерий.

Состав набора

1. Реагент Part A (1 мл): 10 флаконов.
2. Реагент Part B (1 мл): 10 флаконов.
3. Реагент P (R055, 4 мл): 1 флакон.
4. Стерильный шприц (объемом 1 мл): 2 шт.

Состав (г/л)

Формула скорректирована и стандартизирована в соответствии с рабочими параметрами.

Методика проведения анализа

Подготовка тестового образца

1. Используйте только культуры микобактерий возрастом более 3 недель, выращенные на скосах среды Лёвенштейна-Йенсена (Lowenstein-Jensen), имеющих обильный рост. Культуры на других типах сред не вырабатывают достаточного количества ниацина для получения положительного результата. Примечание: ложноотрицательные результаты могут быть связаны с малым количеством микроорганизмов или использованием сред, отличных от Лёвенштейна-Йенсена. Не используйте тест для смешанных культур микобактерий.
2. Добавьте 2 мл стерильной дистиллированной воды на скос.
3. Разрежьте или проколите скос шпателем или иглой.
4. Проведите экстракцию одним из следующих способов:
   • Инкубируйте скос в вертикальном положении при 37 °C в течение 2 ч в водяной бане.
   • Либо расположите флакон горизонтально при комнатной температуре в течение 20 мин.
   • Либо расположите флакон горизонтально в автоклаве при 121 °C в течение 30 мин.
5. Выдержите скос в вертикальном положении в течение 5 мин.
6. Используйте 1 мл полученного раствора в качестве тестового образца.

Проведение теста

1. Перенесите содержимое флакона Part A (1 мл) в флакон Part B (1 мл). Полученный раствор используйте как рабочий реагент.
2. С помощью шприца перенесите 1 мл тестового образца в раствор реагента (смесь Part A + Part B).
3. Положительная реакция: появление жёлтого окрашивания в течение 5 минут.
4. Отрицательная реакция: окрашивание не появляется в течение 5 минут, раствор остаётся бесцветным.

Контрольные тесты

Положительный контроль:

1. Смешайте содержимое Part A (1 мл) и Part B (1 мл).
2. Перенесите 1 мл реагента P (R055) в раствор реагента с помощью шприца.
3. Ожидайте появления жёлтого окрашивания в течение 5 минут.

Отрицательный контроль:

1. Смешайте содержимое Part A (1 мл) и Part B (1 мл).
2. Перенесите 1 мл стерильной дистиллированной воды или физиологического раствора в раствор реагента с помощью шприца.
3. Раствор должен оставаться бесцветным через 5 минут.

Меры предосторожности и техника безопасности

• Все работы следует проводить в боксе биологической безопасности.
• Реагенты светочувствительны и должны храниться в защищенном от света месте.
• Реагенты Part A и Part B токсичны и могут выделять ядовитые газы; при работе рекомендуется использовать маску-респиратор.
• Не допускайте контакта реагентов с кислотами.
• Реагент Part A является канцерогенным. Избегайте вдыхания паров и контакта с кожей.
• Перед утилизацией пробирки необходимо нейтрализовать, добавив в каждую 10 % раствор NaOH.
• После каждого использования тщательно промывайте шприц стерильной дистиллированной водой.

Условия эксплуатации и хранения

• Температура хранения: +2…+8 °C.
• Срок годности: указан на этикетке.