HiMedia K047-KT Набор для обнаружения ниацина, модифицированный с (1 набор)

Набор для обнаружения ниацина HiMedia K047-KT, модифицированный и укомплектованный стерильным шприцем, предназначен для предварительной идентификации Mycobacterium tuberculosis. Набор применяют для выявления накопления ниацина в культурах микобактерий, при этом тест пригоден только для культур микобактерий старше 3 недель с обильным ростом на скошенной среде Левенштейна—Йенсена.

Идентификация

Назначение

Набор используют для исследования накопления ниацина с целью дифференциации видов Mycobacterium, особенно Mycobacterium tuberculosis, и предварительной идентификации Mycobacterium tuberculosis.

Состав набора

Формула скорректирована и стандартизирована в соответствии с рабочими параметрами.

В комплект входят:

• Часть A: реагент, 1 мл — 10 флаконов.
• Часть B: реагент, 1 мл — 10 флаконов.
• R055: реагент P, 4 мл — 1 флакон.
• Стерильный шприц вместимостью 1 мл — 2 шт.

Принцип реакции и интерпретация

Mycobacterium tuberculosis, а также некоторые изоляты Mycobacterium simiae и Mycobacterium chelonae образуют ниацин в процессе роста. Эти штаммы не метаболизируют ниацин далее, поэтому ниацин накапливается и выделяется в агар или на скошенную поверхность среды. Набор для обнаружения ниацина выявляет накопленный ниацин и тем самым помогает подтвердить наличие M. tuberculosis.

Подготовка исследуемой пробы

1. Используйте только культуру микобактерий возрастом более 3 недель, выращенную на скошенной среде Левенштейна—Йенсена и имеющую обильный рост. Культуры, выращенные на других типах сред, не образуют достаточного количества ниацина для получения положительного результата этим методом.
2. Добавьте к скошенной среде 2 мл стерильной дистиллированной воды.
3. Разрежьте или проколите скошенную среду шпателем либо иглой.
4. Инкубируйте флакон в вертикальном положении при 37 °C в течение 2 ч на водяной бане. В качестве альтернативы флакон можно оставить в горизонтальном положении на 20 мин при комнатной температуре для экстракции. Также флакон можно поместить в горизонтальном положении в автоклав при 121 °C на 30 мин для экстракции ниацина в дистиллированную воду.
5. Оставьте скошенную среду в вертикальном положении на 5 мин.
6. Используйте 1 мл полученного раствора в качестве исследуемой пробы.

Ограничения подготовки пробы

Ложноотрицательные результаты возможны при использовании культур с недостаточным количеством микроорганизмов или культур, выращенных на средах, отличных от среды Левенштейна—Йенсена. Не используйте тест для культур, смешанных с другими микобактериями.

Проведение теста

1. Перенесите содержимое части A, 1 мл, в часть B, 1 мл. Полученный раствор используйте как реагент для дальнейшего анализа.
2. С помощью шприца перенесите 1 мл исследуемой пробы в раствор реагента, состоящий из частей A и B.
3. Положительная реакция: появление жёлтого окрашивания в течение 5 мин.
4. Отрицательная реакция: отсутствие жёлтого окрашивания в течение 5 мин; раствор реагента остаётся бесцветным.

Положительный контроль

1. Перенесите содержимое части A, 1 мл, в часть B, 1 мл. Полученный раствор используйте как реагент для дальнейшего анализа.
2. С помощью шприца перенесите 1 мл R055, реагента P, в раствор реагента, состоящий из частей A и B.
3. Наблюдайте за появлением жёлтого окрашивания в течение 5 мин.

Отрицательный контроль

1. Перенесите содержимое части A, 1 мл, в часть B, 1 мл. Полученный раствор используйте как реагент для дальнейшего анализа.
2. С помощью шприца перенесите 1 мл стерильной дистиллированной воды или физиологического раствора в раствор реагента, состоящий из частей A и B.
3. Через 5 мин раствор должен оставаться бесцветным.

Меры предосторожности

1. Реагенты светочувствительны; не подвергайте их воздействию света.
2. Реагенты частей A и B токсичны и образуют ядовитый газ. Соблюдайте осторожность при обращении с ними. Рекомендуется закрывать ноздри защитной маской.
3. Не допускайте контакта реагента с кислотой.
4. Часть A канцерогенна. Обращайтесь с ней осторожно; не вдыхайте пары и не допускайте контакта с кожей.
5. Перед утилизацией нейтрализуйте пробирки, добавив в каждую 10%-ный раствор NaOH.
6. После каждого использования тщательно промывайте шприц стерильной дистиллированной водой.
7. Все работы выполняйте в шкафу биологической безопасности.

Хранение и срок годности

• Условия хранения: 2–8 °C.
• Срок годности: использовать до даты, указанной на этикетке.

Комплект поставки

• Часть A: реагент, 1 мл — 10 флаконов.
• Часть B: реагент, 1 мл — 10 флаконов.
• R055: реагент P, 4 мл — 1 флакон.
• Стерильный шприц вместимостью 1 мл — 2 шт.