HiMedia K044-KT Набор для теста на каталазу для микобактерий (1 набор)

Диагностический набор HiMedia K044-KT Набор для теста на каталазу для микобактерий (1 набор) предназначен для определения активности каталазы у микобактерий с использованием 30 % перекиси водорода и 10 % Tween 80. Набор применяется для полуколичественного определения каталазы и выявления термостабильной каталазы при нагревании образца до 68 °C в течение 20 мин.

Назначение

Набор предназначен для исследования активности каталазы у микобактерий.

Тип образца: клинические образцы, мокрота.

Идентификация изделия

Комплект набора

Принцип измерения

Большинство микобактерий вырабатывает фермент каталазу, однако количество образуемой каталазы различается. Микроорганизмы, продуцирующие каталазу, способны разлагать перекись водорода на воду и свободный кислород:

2H₂O₂ → 2H₂O + O₂

Термостабильную каталазу выявляют после инактивации при 68 °C в течение 20 мин. Полуколичественная оценка каталазы и устойчивость каталазы к нагреванию при 68 °C и pH 7,0 используются как характеристики при идентификации микобактерий.

Тест на каталазу микобактерий отличается от теста для других типов бактерий применением 30 % перекиси водорода в растворе сильного детергента Tween 80 (10 %) вместо обычного 3 % раствора перекиси водорода. Детергент диспергирует гидрофобные плотно агрегированные микобактерии, разделяя крупные агрегаты на отдельные бациллы и повышая выявляемость каталазы.

Подготовка реагента

Непосредственно перед применением смешайте равные объёмы реагента R058, часть A, и реагента R058, часть B. Осторожно встряхните смесь.

Методика проведения анализа

Полуколичественный тест

1. Засейте поверхность среды в стеклянной пробирке SL122-HiCatalase™ с 5 мл среды L.J. 0,1 мл 7-дневной жидкой культуры исследуемого организма.
2. Инкубируйте при 37 °C в течение двух недель.
3. Слегка ослабьте крышки пробирок для обеспечения достаточного воздухообмена.
4. Добавьте 1 мл свежеприготовленного реагента для каталазы R058 и оставьте пробирку в вертикальном положении на 5 мин.
5. Измерьте высоту столбика пузырьков или пены над поверхностью питательной среды и зарегистрируйте результат.

Исследование термостабильной каталазы

Определение термостабильной каталазы является характеристикой, применяемой при идентификации непигментированных микобактерий. Термолабильная каталаза характерна для M. tuberculosis, M. bovis, M. gastri и отдельных штаммов комплекса M. avium.

1. Эмульгируйте несколько колоний исследуемого организма в 0,5 мл буфера для каталазы R057, входящего в комплект. Завинтите пробирку.
2. Поместите пробирки на водяную баню при 68 °C на 20 мин.
3. Извлеките пробирку и охладите до комнатной температуры.
4. Добавьте 0,5 мл свежеприготовленного реагента для каталазы R058.
5. Наблюдайте за образованием пузырьков на поверхности жидкости.
6. Не считайте реакцию отрицательной до истечения 20 мин.

Интерпретация результатов

В обоих тестах наличие каталазы определяется по образованию пузырьков. Не встряхивайте пробирку: присутствие детергента в смеси может создать ложное впечатление образования пузырьков.

Полуколичественный тест на каталазу

• Столбик пузырьков высотой 5–50 мм: слабоположительная реакция.
• Столбик пузырьков высотой более 50 мм: сильноположительная реакция.
• Отсутствие пузырьков: отрицательная реакция.

Тест на термостабильную каталазу

• Образование пузырьков: положительная реакция.
• Отсутствие пузырьков: отрицательная реакция.

Биохимические результаты

Контроль качества

Внешний вид и состав набора

Содержимое каждого набора:

1. Стеклянные пробирки SL122-HiCatalase™ с 5 мл среды L.J. — 5 шт.
2. Буфер для каталазы R057 для исследования термостабильной каталазы — 5 шт.
3. Реагент для каталазы R058:
   • часть A — H₂O₂ (30 %), 5 мл;
   • часть B — Tween 80 (10 %), 5 мл.

Полуколичественный тест на каталазу

Непосредственно перед применением добавьте 1 мл свежеприготовленного реагента R058, состоящего из частей A и B, к исследуемой культуре, внесённой в стеклянную пробирку SL122-HiCatalase™ с 5 мл среды L.J. и инкубированной при 37 °C в течение двух недель.

Тест на термостабильную каталазу

Эмульгируйте несколько колоний или клеточную массу с поверхности среды в пробирке SL122 в 0,5 мл реагента R057.

Поместите пробирки на водяную баню при 68 °C на 20 мин. Извлеките пробирку и охладите до комнатной температуры. Добавьте 0,5 мл свежеприготовленного реагента R058.

Проверка стерильности

Соответствует критериям выпуска.

Пробоподготовка и обращение с образцами

Для клинических образцов применяйте соответствующие методы обращения с образцами в соответствии с установленными методическими указаниями (1, 2).

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Ограничения применения

Для анализа необходимо использовать хорошо изолированные колонии.

Предупреждения и меры предосторожности

• Только для диагностики in vitro.
• Перед открытием контейнера прочитайте маркировку.
• При работе используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• Соблюдайте правила надлежащей микробиологической работы при обращении с образцами и культурами.
• При работе с клиническими образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности в соответствии с установленными методическими указаниями.
• Требования безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Оценка рабочих характеристик

Рабочие характеристики среды соответствуют ожидаемым при использовании согласно инструкции на этикетке, в пределах срока годности и при хранении при рекомендованной температуре.

Хранение и срок годности

Температура хранения при получении: 2–8 °C.

Использовать до даты окончания срока годности, указанной на этикетке. Рабочие характеристики продукта сохраняются при использовании в течение установленного срока годности.

Утилизация

Пользователь обязан обеспечить безопасную утилизацию использованных или непригодных препаратов посредством автоклавирования и/или сжигания.

При утилизации инфекционных материалов соблюдайте установленные лабораторные процедуры. Материалы, контактировавшие с клиническим образцом, должны быть обеззаражены и утилизированы в соответствии с действующими лабораторными методиками.