HiMedia K044-KT Набор для теста на каталазу для микобактерий (1 набор)

Набор для теста на каталазу для микобактерий HiMedia K044-KT предназначен для изучения каталазной активности микобактерий. Применяется для идентификации видов микобактерий, включая определение термостабильной каталазы, и требует хранения при температуре +2…+8 °C.

Принцип измерения

Определение основано на способности фермента каталазы разлагать пероксид водорода с выделением свободного кислорода и воды: 2H₂O₂ → 2H₂O + O₂

В отличие от стандартных тестов на каталазу для других бактерий, в данном наборе используется 30 % раствор пероксида водорода в сильном моющем средстве (10 % Твин 80). ПАВ (Твин 80) способствует диспергированию гидрофобных плотных скоплений микобактерий, разделяя агрегаты на отдельные бациллы, что максимально повышает чувствительность обнаружения каталазы.

Область применения

Набор используется для дифференциации микобактерий. Определение термостабильной каталазы является важным признаком при идентификации непигментированных микобактерий. Термолабильная каталаза характерна для M. tuberculosis, M. bovis, M. gastri и отдельных штаммов комплекса M. avium.

• Тип образца: клинические образцы (мокрота).
• Ограничения: необходимо использовать хорошо изолированные колонии.

Комплект поставки

1. Стеклянные трубки SL122 HiCatalase™ с 5 мл среды Лёвенштайна-Йенсена (L.J. Medium) — 5 шт.
2. Каталазный буфер R057 (для изучения термостабильной каталазы), 0,5 мл — 5 шт.
3. Каталазный реагент R058:
   • Часть А: H₂O₂ (30 %) — 5 мл.
   • Часть B: Твин 80 (10 %) — 5 мл.

Методика проведения анализа

Подготовка реагента

Непосредственно перед использованием смешайте равные объемы частей А и В реагента R058. Осторожно перемешайте.

I. Полуколичественный тест

1. Инокулируйте поверхность среды L.J. в трубке SL122 0,1 мл 7-дневной жидкой культуры исследуемого организма.
2. Инкубируйте при температуре 37 °C в течение двух недель. Крышки трубок должны быть слегка приоткрыты для обеспечения adequate обмена воздуха.
3. Добавьте 1 мл свежеприготовленного каталазного реагента R058.
4. Оставьте трубку в вертикальном положении на 5 минут.
5. Измерьте высоту столба пузырьков (вспенивания) над поверхностью питательной среды и зафиксируйте результат.

II. Определение термостабильной каталазы

1. Эмульгируйте несколько колоний исследуемого организма в 0,5 мл каталазного буфера R057. Плотно закройте трубку.
2. Поместите трубки в водяную баню при температуре 68 °C на 20 минут.
3. Извлеките трубку и дайте ей остыть до комнатной температуры.
4. Добавьте 0,5 мл свежеприготовленного каталазного реагента R058.
5. Наблюдайте за появлением пузырьков на поверхности жидкости.
6. Результат считается отрицательным, если пузырьки не появились в течение 20 минут.

Интерпретация результатов

Присутствие каталазы характеризуется образованием пузырьков. Трубку нельзя встряхивать, так как присутствие моющего средства в смеси может создать ложное впечатление образования пузырьков.

Результаты полуколичественного теста

• Сильноположительный: высота столба пузырьков > 50 мм.
• Слабоположительный: высота столба пузырьков 5–50 мм.
• Отрицательный: пузырьки отсутствуют.

Результаты теста на термостабильную каталазу

• Положительный: появление пузырьков.
• Отрицательный: пузырьки отсутствуют.

Сводная таблица биохимических результатов

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение: при температуре +2…+8 °C.
• Меры предосторожности: только для диагностики in vitro. Использовать средства индивидуальной защиты (перчатки, одежда, защита глаз и лица).
• Утилизация: загрязненные материалы должны быть стерилизованы в автоклаве перед утилизацией.