Набор для окраски по Граму HiMedia K001-1KT

Набор реагентов для микробиологии Набор для окраски по Граму HiMedia K001-1KT используется для дифференциации бактерий по грамположительной или грамотрицательной природе. Набор предназначен для последовательной обработки мазка кристаллическим фиолетовым, йодом, обесцвечивающим раствором и сафранином с последующей микроскопией окрашенного препарата.

Назначение

Набор предназначен для дифференциации микроорганизмов методом окраски по Граму. Метод позволяет определить грамположительную или грамотрицательную природу бактерий по способности клеточной стенки удерживать основной краситель после обработки йодом и обесцвечивания.

Принцип окраски по Граму

Структура клеточной стенки микроорганизма определяет результат окраски. Грамположительные микроорганизмы содержат большое количество мукопептидов в клеточной стенке, а также полимеры глицерина, почти отсутствующие у грамотрицательных микроорганизмов. Поэтому клетки грамположительных бактерий образуют прочное соединение с трифенилметановыми красителями — генциановым, метиловым фиолетовым или кристаллическим фиолетовым.

Грамотрицательные микроорганизмы содержат больше полисахаридов и липопротеинов. С основными красителями и йодом они образуют соединение, которое легко разрушается под действием спирта или ацетона. После обесцвечивания клетки грамотрицательных бактерий окрашиваются сафранином в красный цвет.

Производитель описывает метод как последовательное нанесение основного красителя, фиксацию красителя протравой, обесцвечивание и контрастное окрашивание. Часть бактерий удерживает основной краситель, сопротивляясь обесцвечиванию, а другие бактерии обесцвечиваются под действием обесцвечивающего раствора.

Методика проведения окраски

1. Приготовьте тонкий мазок из бактериальных клеток.
2. Последовательно обработайте мазок кристаллическим фиолетовым и йодным раствором.
3. Обесцветьте мазок спиртом или ацетоном для удаления кристаллического фиолетового из клеток.
4. Обработайте мазок сафранином для получения контрастного изображения.
5. Окрашенный мазок микроскопируйте в масле с использованием иммерсионного объектива либо заключите препарат в бальзам.

Результат окраски

• Грамположительные бактерии: сине-фиолетовый или тёмно-синий цвет.
• Грамотрицательные бактерии: розово-красный, красный или коричневый цвет.

Состав набора

• S012 Кристаллический фиолетовый: 125 мл.
• S013 Йодный раствор: 125 мл.
• S032 Обесцвечивающий раствор: 2 × 125 мл.
• S027 Сафранин, 0,5 % масс./объём, второй краситель: 125 мл.

Технические характеристики

• Наименование: Набор для окраски по Граму HiMedia K001-1KT.
• Производитель: HiMedia.
• Назначение изделия: краситель.
• Метод анализа: окраска по Граму.
• Область применения: дифференциация микроорганизмов по грамположительной или грамотрицательной природе.
• Сертификат: ФСЗ 2009/03635.
• Регистрация: ФС СЗ.
• Условия хранения: при температуре ниже 30 °C, в плотно закрытой упаковке, в защищённом от света месте.
• Срок использования: до даты, указанной на этикетке.
• Требования безопасности: огнеопасно.

Область применения

Набор применяют для микроскопической дифференциации бактерий в микробиологических и санитарно-бактериологических исследованиях по результатам окраски клеток с последующим использованием иммерсионного объектива или заключением препарата в бальзам.