HiMedia HD029-10TB HiDip PCA с TTC и нейтрализаторами - Rose Bengal (10 планшетов)

Готовая комбинированная питательная среда на планшете HiMedia HD029-10TB HiDip PCA с TTC и нейтрализаторами - Rose Bengal (10 планшетов) с двумя рабочими поверхностями: PCA с TTC и нейтрализаторами и агар Розовый бенгальский с хлорамфениколом и нейтрализаторами. Предназначена для количественного контроля общей бактериальной обсеменённости, дрожжей и плесневых грибов на поверхностях и в жидкостях, включая образцы с остатками антисептиков и дезинфицирующих средств.

Состав

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих характеристик.

Методика применения

Исследование поверхностей

1. Ослабьте крышку и извлеките планшет HiDip из контейнера.
2. Соблюдая асептические условия, снимите с планшета защитную пластиковую накладку, не касаясь поверхностей агара.
3. Проверьте планшет на отсутствие обезвоживания и загрязнения.
4. Осторожно опустите планшет и прижмите агар к исследуемой поверхности, согнув держатель по линии шарнира.
5. Прикладывайте равномерное плотное давление в течение нескольких секунд. Не допускайте размазывания агара по исследуемой поверхности.
6. Повторите процедуру со второй агаровой поверхностью на участке, расположенном рядом с первым.
7. Верните планшет в контейнер и плотно закройте его.
8. Инкубируйте контейнер в вертикальном положении при указанной температуре.

Исследование жидкостей

1. Ослабьте крышку и извлеките планшет HiDip из контейнера.
2. Соблюдая асептические условия, снимите с планшета защитную пластиковую накладку, не касаясь поверхностей агара.
3. Проверьте планшет на отсутствие обезвоживания и загрязнения.
4. Погрузите планшет в исследуемую жидкость так, чтобы поверхность агара была полностью покрыта. При недостаточном объёме жидкой пробы налейте пробу непосредственно на поверхность планшета.
5. Дайте излишкам жидкости стечь.
6. Верните планшет в контейнер и плотно закройте его.
7. Инкубируйте контейнер в вертикальном положении при указанной температуре.
8. Для последующей идентификации промаркируйте контейнер, указав номер и источник образца, дату, время и другие необходимые сведения.

Утилизация

Использованные планшеты HiDip следует переносить и обрабатывать с осторожностью, поскольку они содержат живые микроорганизмы. Планшеты можно утилизировать одним из следующих способов:

• погрузить на ночь в подходящий дезинфицирующий раствор, например раствор на основе Dettol или фенольного дезинфектанта;
• ослабить крышку и автоклавировать планшет.

Автоклав не является обязательным: для обработки допускается использовать бытовую скороварку.

Принцип действия и интерпретация результатов

PCA с TTC и нейтрализаторами

Агар для подсчёта общего числа микроорганизмов (PCA) сформулирован по Buchbinder et al. (1) и рекомендован APHA (2, 3, 4) и FDA (5).

Ферментативный гидролизат казеина обеспечивает аминокислотами и другими сложными азотистыми соединениями. Дрожжевой экстракт служит источником витаминов группы B.

APHA рекомендует метод заливных чашек. Образцы разводят, после чего соответствующие разведения вносят в чашки Петри. В чашки добавляют стерильный расплавленный агар, затем чашки осторожно вращают для равномерного смешивания образца с агаром. Метод подсчёта на заливных чашках предпочтительнее метода поверхностного посева, поскольку обеспечивает более высокие результаты. Агар PCA также подходит для определения количества бактерий в чистых помещениях.

Агар Розовый бенгальский с хлорамфениколом и нейтрализаторами

Агар Розовый бенгальский первоначально разработан Jarvis и позднее модифицирован Overcast и Weakley (2). Использование розового бенгальского в средах с нейтральным pH описано Smith и Dawson (3).

Микологический пептон, или папаиновый перевар соевой муки, обеспечивает необходимые питательные вещества для роста. Декстроза является ферментируемым углеводом. Хлорамфеникол ингибирует грамотрицательные бактерии. Краситель розовый бенгальский подавляет развитие бактерий и уменьшает расползание плесневых грибов, контролирует размер и высоту колоний таких плесневых грибов, как Rhizopus spp. (4). Нейтральный pH среды в сочетании с антибиотиком обеспечивает селективные свойства среды (5, 6). Розовый бенгальский поглощается колониями плесневых грибов и дрожжей, что способствует их подсчёту.

Количество дрожжей или плесневых грибов в 1 г или 1 мл исследуемого образца рассчитывают умножением числа колоний на коэффициент разведения. Бактерии и дрожжи могут иметь сходный внешний вид, поэтому для их различения следует проводить микроскопическое исследование.

Из-за селективных свойств среды и типа исследуемого образца отдельные штаммы грибов могут плохо расти или не расти на полной среде. Аналогично, некоторые штаммы бактерий могут не подавляться либо подавляться только частично. Среду необходимо защищать от воздействия света, поскольку фотодеградация розового бенгальского приводит к образованию соединений, токсичных для грибов (7, 8).

Нейтрализация антисептиков и дезинфицирующих средств

Формулы содержат нейтрализующие вещества, которые обезвреживают широкий спектр антисептиков и дезинфицирующих средств, включая четвертичные аммониевые соединения, фенольные соединения, препараты йода и хлора, ртутные соединения, формальдегид и глутаральдегид (1).

Назначение нейтрализующих компонентов:

• бисульфит натрия нейтрализует альдегиды;
• тиогликолат натрия нейтрализует ртутные соединения;
• тиосульфат натрия нейтрализует йод и хлор (1);
• лецитин нейтрализует четвертичные аммониевые соединения;
• полисорбат 80 — неионогенное поверхностно-активное вещество — нейтрализует замещённые фенольные соединения (2–5).

Для испытаний применяются следующие дезинфицирующие средства и концентрации: 2 % хлора, 2 % формальдегида, 1 % глутаральдегида, 2 % йода, 2 % фенола, четвертичные аммониевые соединения в разведении 1/750, ртутные соединения в разведении 1/1000.

Контроль качества

Внешний вид

Планшет HiDip содержит комбинацию стерильной среды PCA с TTC и нейтрализаторами и среды Розовый бенгальский с нейтрализаторами, нанесённых на отдельные рабочие поверхности.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики для среды PCA с TTC и нейтрализаторами определяют после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч; для среды Розовый бенгальский с нейтрализаторами — после инкубации при 20–25 °C в течение 48–72 ч.