Питательная среда HiMedia HD019-5TB HiDip Среда PCA-Мальтозный экстракт агар — стерильная комбинированная среда для подсчёта общего количества бактерий и выделения дрожжей и плесневых грибов. HiMedia HD019-5TB применяется для анализа пищевых продуктов, молочных продуктов и воды; содержит по 2,5 мл среды на каждую поверхность предметного стекла HiDip™.

Назначение

Среда предназначена для подсчёта общего количества бактерий, а также выделения дрожжей и плесневых грибов.

Состав

Агар для подсчёта общего количества микроорганизмов (PCA)

Состав, г/л:

Компонент	г/л
Триптон	5,000
Дрожжевой экстракт	2,500
Декстроза (глюкоза)	1,000
Агар	15,000
Индикатор роста	0,100

Конечный pH при 25 °C: 7,1 ± 0,2.

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих характеристик.

Мальтозный экстракт агар

Состав, г/л:

Компонент	г/л
Солодовый экстракт	30,000
Микологический пептон	5,000
Агар	15,000

Конечный pH при 25 °C: 5,4 ± 0,2.

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих характеристик.

Методика применения

Анализ поверхностей

1. Ослабьте крышку и извлеките предметное стекло HiDip™ из контейнера, не касаясь поверхностей агара.
2. Проверьте отсутствие обезвоживания или загрязнения.
3. Осторожно опустите предметное стекло и прижмите агар к исследуемой поверхности, согнув корпус вокруг линии шарнира.
4. Прилагайте равномерное и достаточное давление в течение 15–20 с. Не допускайте размазывания агара по исследуемой поверхности.
5. Повторите процедуру со второй агаровой поверхностью на участке, расположенном рядом с первоначальной зоной анализа.
6. Верните предметное стекло в контейнер и плотно закройте его.
7. Инкубируйте контейнер в вертикальном положении при указанной температуре.

Анализ жидкостей

1. Ослабьте крышку и извлеките предметное стекло HiDip™ из контейнера.
2. Проверьте отсутствие обезвоживания или загрязнения.
3. Погрузите предметное стекло в исследуемую жидкость на срок до 15–20 с, чтобы поверхность агара была полностью покрыта жидкостью.
4. При недостаточном объёме жидкой пробы налейте пробу непосредственно на поверхность предметного стекла.
5. Дайте избыточной жидкости стечь.
6. Слегка постучите по предметному стеклу, чтобы удалить остатки жидкости с поверхности.
7. Верните предметное стекло в контейнер и плотно закройте его.
8. Инкубируйте контейнер в вертикальном положении при указанной температуре.
9. Промаркируйте контейнер, указав номер и источник пробы, дату, время и другие сведения, необходимые для идентификации.

Принцип действия и интерпретация

Агар для подсчёта общего количества микроорганизмов

Агар PCA разработан по составу, описанному Buchbinder и соавторами, и рекомендован для применения APHA и FDA. APHA рекомендует метод посева в расплавленный агар.

Триптон обеспечивает азотистые и углеродистые соединения, аминокислоты с длинной цепью и другие необходимые питательные вещества. Дрожжевой экстракт служит источником витаминов группы B.

Для подсчёта микроорганизмов образцы разводят, после чего подходящие разведения вносят в чашки Петри. В чашки добавляют стерильный расплавленный агар и осторожно вращают чашки для равномерного перемешивания пробы с агаром. Метод подсчёта в заливных чашках предпочтительнее метода поверхностного посева, поскольку обеспечивает более высокие результаты. Агар PCA также подходит для определения количества бактерий в стерильных помещениях.

Мальтозный экстракт агар

Лабораторная диагностика грибковых инфекций в значительной степени основана на прямых, а не непрямых методах. Солод и солодовые экстракты широко применяются для культивирования дрожжей и плесневых грибов. Reddish описал питательную среду на основе солодового экстракта как приемлемую замену суслу.

Мальтозная среда аналогична формуле Galloway и Burgess, применяемой для обнаружения, выделения и подсчёта дрожжей и плесневых грибов. Солодовый экстракт создаёт кислую среду и обеспечивает питательные вещества, благоприятные для роста и метаболизма дрожжей и плесневых грибов. Микологический пептон обеспечивает быстрый обильный рост с типичной морфологией и пигментацией.

Типы образцов

• Пищевые продукты и молочные продукты.
• Образцы воды.

Отбор и обращение с образцами

Отбор и обращение с образцами выполняют в соответствии с методикой применения, приведённой в разделе «Методика применения».

Предупреждения и меры предосторожности

• Перед открытием контейнера прочитайте маркировку.
• При работе используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• При обращении с образцами и культурами соблюдайте правила надлежащей микробиологической лабораторной практики.
• При работе с образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности в соответствии с установленными руководствами.
• Требования безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Ограничения применения

Ограничения относятся к агару PCA и мальтозному экстрактному агару.

1. Отдельные микроорганизмы имеют различные требования к условиям роста и могут демонстрировать на среде неодинаковые характеристики роста.
2. Каждая партия среды испытана на микроорганизмах, указанных в сертификате анализа (COA). При необходимости выявления микроорганизмов, не указанных в сертификате анализа, пользователю рекомендуется валидировать среду с учётом специфических требований конкретного применения.
3. Для окончательной идентификации необходимо провести дополнительные биохимические исследования.

Рабочие характеристики и оценка

Рабочие характеристики среды обеспечиваются при применении в соответствии с указаниями на этикетке, в пределах срока годности и при хранении в рекомендованном температурном диапазоне.

Контроль качества

Внешний вид

Предметное стекло HiDip™ содержит комбинацию стерильной среды PCA и мальтозного экстрактного агара, нанесённых на отдельные поверхности.

Цвет

• Цвет агара PCA: светло-жёлтая среда.
• Цвет мальтозного экстрактного агара: светло-коричневая среда.

Количество среды

Количество среды: 2,5 мл на поверхность.

Значение pH среды PCA

Диапазон pH: 6,90–7,30.

Значение pH мальтозного экстрактного агара

Диапазон pH: 5,20–5,60.

Проверка стерильности

Среда соответствует критериям выпуска.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики для среды PCA оценивают после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч; для мальтозного экстрактного агара — после инкубации при 25–30 °C в течение 48–72 ч.

Организм	Рост	Цвет колонии
Среда PCA
*Bacillus spizizenii* ATCC 6633 (00003*)	обильный	от красного до бордового
*Enterococcus faecalis* ATCC 29212 (00087*)	обильный	от красного до бордового
*Escherichia coli* ATCC 25922 (00013*)	обильный	от красного до бордового
*Lactobacillus casei* ATCC 9595	обильный	от красного до бордового
$\*$Klebsiella aerogenes*$ ATCC 13048 (00175*)	обильный	от красного до бордового
Мальтозный экстрактный агар
# *Aspergillus brasiliensis* ATCC 16404	обильный	—
*Candida albicans* ATCC 10231 (00054*)	обильный	от грязно-белого до кремового
*Saccharomyces cerevisiae* ATCC 9763 (00058*)	обильный	от грязно-белого до кремового

Обозначения

• * Соответствующие номера WDCM.
• ** Ранее назывался Bacillus subtilis subsp. spizizenii.
• $ Ранее назывался Enterobacter aerogenes.

• Ранее назывался Aspergillus niger.

Хранение и срок годности

• Условия хранения после получения: 15–30 °C.
• Использовать до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.
• Рабочие характеристики продукта сохраняются при использовании в течение указанного срока годности.

Утилизация

Использованные предметные стёкла HiDip™ следует переносить с осторожностью, поскольку они содержат живые микроорганизмы.

Предметные стёкла можно утилизировать одним из следующих способов:

• погрузить на ночь в подходящий дезинфицирующий раствор, например раствор на основе Dettol или фенольного дезинфицирующего средства;
• автоклавировать после ослабления крышки.

При утилизации инфекционных материалов соблюдайте установленные лабораторные процедуры. Материалы, контактировавшие с образцом, необходимо обеззаразить и утилизировать в соответствии с действующими лабораторными методиками.