HiMedia GMH443-500G Усиленная среда для клостридий

Усиленная среда для клостридий HiMedia GMH443-500G (производство HiMedia) предназначена для обогащения культур Clostridia из фармацевтических продуктов. Среда разработана в соответствии с гармонизированной методикой микробиологического контроля USP/EP/BP/JP/IP; вес упаковки составляет 500 г.

Область применения

Среда рекомендуется для проверки стерильности нестерильных продуктов, пищевых и диетических добавок. Применяется для инициации роста при малых посевных дозах и получения максимального числа жизнеспособных клеток клостридий. Также используется в исследованиях спорообразующих анаэробов (в частности, Clostridium butyricum в сыре), для количественного определения клостридий методом серийных разведений в пробирках или для подготовки чашек при изоляции. В среде также растут другие спорообразующие анаэробы, стрептококки и лактобациллы.

Принцип работы

Среда является обогащающей, но не селективной.

• Пептон, дрожжевой экстракт и HM-пептон B: источники углерода и азота, длинноцепочечные аминокислоты, витамины и другие питательные вещества, необходимые для роста клостридий.
• Глюкоза моногидрат: ферментируемый углевод.
• Хлорид натрия: поддерживает осмотический баланс.
• Гидрохлорид цистеина: выступает в роли восстановителя.
• Растворимый крахмал: в небольшом количестве удаляет токсичные метаболиты из среды.
• Ацетат натрия: служит буферным агентом.
• Агар: в малом количестве делает среду полужидкой, что способствует поддержанию анаэробных условий.

Состав, г/л

Примечание: при необходимости pH корректируется таким образом, чтобы после стерилизации он составлял 6,8 ± 0,2. pH также может быть измерен после стерилизации при 25 °C. Формула скорректирована и стандартизирована в соответствии с параметрами эффективности. #Эквивалент мясного экстракта.

Методика приготовления и использования

Приготовление среды

1. Суспендируйте 37,54 г сухой среды (эквивалентный вес на 1 литр) в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения компонентов.
3. Разлейте в пробирки или колбы по мере необходимости.
4. Стерилизуйте в автоклаве при температуре 121 °C (давление $\approx$0,1 МПа / 15 psi) в течение 15 минут или согласно валидированному циклу.

Работа с образцами

Для фармацевтических образцов следует использовать соответствующие методы сбора и обработки согласно фармацевтическим руководствам. После использования загрязненные материалы должны быть стерилизованы в автоклаве перед утилизацией.

Технические характеристики

Контроль качества и оценка эффективности

Тест на стимулирование роста

Проводится в соответствии с гармонизированным методом USP/EP/BP/JP/IP. Рост наблюдается в анаэробных условиях после инкубации при 30–35 °C в течение $\le$48 часов. Считается положительным, если наблюдается четко видимый рост микроорганизма (при посеве не более 100 КОЕ), сопоставимый с ранее протестированной и одобренной партией среды.

Культуральные характеристики

Наблюдаются в анаэробной атмосфере после инкубации при 30–35 °C в течение 24–48 часов.

Ограничения и меры предосторожности

• Некоторые виды Clostridium могут демонстрировать слабый рост из-за вариаций в питательных потребностях.
• Для полной идентификации необходимо проведение дополнительных биохимических тестов.
• При работе со средой следует использовать защитные перчатки, спецодежду и средства защиты глаз/лица, соблюдая правила надлежащей микробиологической лабораторной практики.

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение сухой среды: в плотно закрытом контейнере при температуре 10–30 °C в сухом вентилируемом помещении, вдали от источников возгорания и экстремальных температур.
• Хранение готовой среды: при температуре 20–30 °C.
• Особенности: из-за гигроскопичности продукта после вскрытия флакон необходимо плотно закрыть во избежание образования комков.