Питательная среда Цетримидный агар, гранулированный HiMedia GMH024-500G (500 г) с гранулированной формой предназначена для микробиологического анализа фармацевтических образцов. Среда используется для селективного выделения Pseudomonas aeruginosa и может обеспечивать слабый рост отдельных штаммов из-за токсичности цетримida для некоторых микроорганизмов.

Назначение

Цетримидный агар предназначен для селективного выделения Pseudomonas aeruginosa из фармацевтических препаратов в рамках испытаний на микробиологические пределы по гармонизированной методике USP/EP/BP/JP. Среду также применяют для испытаний на микробиологические пределы нестерильных препаратов, а также для определения способности микроорганизмов образовывать флуоресцеин и пиоцианин.

Тип образца

• Образец: фармацевтические препараты

Состав

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих характеристик.

Панкреатический перевар желатина

Принцип действия и интерпретация результатов

Цетримидный агар представляет собой селективную питательную среду для выделения Pseudomonas aeruginosa из фармацевтических препаратов. Цетримид, или N-ацетил-N,N,N-триметиламмонийбромид, действует как катионное поверхностно-активное вещество и четвертичное аммониевое соединение. Цетримид подавляет рост бактерий, отличных от Pseudomonas aeruginosa, вызывая высвобождение азота и фосфора из бактериальных клеток.

Хлорид магния и сульфат калия усиливают образование пиоцианина — сине-зелёного пигмента, диффундирующего в питательную среду, что облегчает обнаружение Pseudomonas. Ионы магния также могут нейтрализовать ЭДТА, если это соединение присутствует в образце. Желатиновый пептон обеспечивает необходимые питательные вещества для роста Pseudomonas, а глицерин служит медленно и непрерывно высвобождающимся источником углерода для растущих клеток.

Для выделения Pseudomonas aeruginosa чашки с цетримидным агаром следует инокулировать материалом из неселективной среды, например среды с переваром соево-казеинового субстрата (MH011). При высокой концентрации микроорганизмов исследуемую пробу можно непосредственно наносить на цетримидный агар. Колонии Pseudomonas aeruginosa могут иметь зелёную пигментацию, которая также проявляется при ультрафиолетовом освещении.

Методика приготовления среды

1. Суспендируйте 45,3 г гранулированной среды в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды, содержащей 10 мл глицерина.
2. Нагрейте суспензию до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов на квадратный дюйм (≈0,103 МПа) и температуре 121 °C в течение 15 мин либо используйте валидированный цикл стерилизации.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. Тщательно перемешайте среду и разлейте в стерильные чашки Петри.

Технические характеристики

Контроль качества

Внешний вид

Гранулированная среда кремового или жёлтого цвета.

Гелеобразование

Плотный гель, сопоставимый с 1,36%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

В чашках Петри образуется гель светло-янтарного цвета с опалесценцией и небольшим осадком.

pH

pH приготовленной среды: 7,00–7,40.

Испытание стимулирования роста

Испытание стимулирования роста проводят в соответствии с гармонизированной методикой USP/EP/BP/JP. Культуральную реакцию оценивают после инкубации при температуре 30–35 °C в течение установленного времени. Степень восстановления принимают равной 100 % от роста бактерий на соево-казеиновом агаре с переваром.

Стимулирующие рост свойства

Рост микроорганизма, сопоставимый с ростом, ранее полученным на предварительно испытанной и утверждённой партии среды, должен наблюдаться при установленной температуре не позднее минимального периода времени, указанного для испытания, при внесении посевной дозы ≤100 КОЕ. Условия испытания: 30–35 °C, ≤18 ч.

Ингибирующие свойства

Рост тестируемого микроорганизма не должен наблюдаться при установленной температуре в течение периода времени, не меньшего максимального периода, указанного для испытания, при внесении посевной дозы ≥100 КОЕ. Условия испытания: 30–35 °C, ≥72 ч.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивают после инкубации при 30–35 °C в течение 18–72 ч. Степень восстановления принимают равной 100 % от роста бактерий на соево-казеиновом агаре с переваром.