Пептонная вода, забуференная HiMedia GM614-500G (500 г)

Гранулированная питательная среда Пептонная вода, забуференная HiMedia GM614-500G (500 г) с конечным pH 7,2 ± 0,2. Предназначена для предварительного обогащения пищевых и молочных образцов с целью восстановления повреждённых клеток Salmonella перед селективным обогащением и выделением.

Назначение

Среда применяется для предварительного обогащения пищевых и молочных образцов перед селективным обогащением и выделением Salmonella. Методика также предусматривает применение среды для анализа сухих кормов для птицы и обогащения при выявлении Escherichia coli O157:H7 с использованием добавки CCV Supplement (FD247).

Среда не содержит ингибирующих компонентов, обладает буферными свойствами и создаёт условия для восстановления сублетально повреждённых клеток, чувствительных к низкому pH. Повреждение клеток Salmonella может быть вызвано нагреванием, обезвоживанием, высоким осмотическим давлением, консервантами или изменением pH в процессе сохранения пищевых продуктов.

Состав

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих характеристик.

Принцип действия и интерпретация

Пептонная вода, забуференная, используется как среда предварительного обогащения перед переносом материала на селективную среду. Протеозопептон служит источником углерода, азота, витаминов и минеральных веществ. Хлорид натрия поддерживает осмотический баланс, а фосфаты буферизуют среду.

Питательная среда обеспечивает высокую степень восстановления сублетально повреждённых бактерий и поддерживает интенсивный рост. Фосфатная буферная система предотвращает повреждение бактерий вследствие изменения pH среды. Это особенно важно для растительных образцов с низкой буферной ёмкостью.

При предварительном обогащении пептонной водой, забуференной, при 37 °C в течение 18 ч перед селекцией в тетратионатном желчно-зелёном бульоне были получены более высокие результаты по сравнению с прямым методом селекции при исследовании мяса, искусственно контаминированного сублетально повреждёнными микроорганизмами. Лактозный бульон также часто применяют как среду предварительного обогащения, однако он может ухудшать восстановление Salmonella.

Методика приготовления среды

1. Суспендируйте 20,0 г среды в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. При необходимости нагрейте суспензию до полного растворения среды.
3. Разлейте среду по 50 мл в пробирки или колбы либо в требуемом объёме.
4. Стерилизуйте автоклавированием при температуре 121 °C в течение 15 мин. Давление 15 фунтов на кв. дюйм соответствует приблизительно 0,103 МПа.
5. При необходимости в асептических условиях добавьте регидратированное содержимое одного флакона добавки CCV Supplement (FD247) к 1000 мл среды для обогащения при выявлении Escherichia coli O157:H7.

Методика проведения анализа

1. Внесите 10 г образца в 50 мл приготовленной среды.
2. Инкубируйте при 35–37 °C в течение 18 ч.
3. Перенесите 10 мл полученной культуры в 100 мл тетратионатного бульона (M032).
4. Инкубируйте при 43 °C в течение 24–48 ч.
5. Выполните пересев на селективные плотные питательные среды.
6. Исследуйте чашки на наличие характерных колоний Salmonella.

Для восстановления культур при оценке культуральных характеристик используют XLD-агар (M031).

Тип образцов

• Пищевые образцы.
• Молочные образцы.
• Сухие корма для птицы.

Сбор и обращение с образцами

Для пищевых и молочных образцов применяйте соответствующие методики отбора и подготовки проб согласно установленным руководствам. После использования контаминированные материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Контроль качества

Внешний вид

Цвет гранулированной среды: от кремового до жёлтого.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

Приготовленная среда представляет собой прозрачный раствор светло-жёлтого цвета без осадка.

Реакция среды

Реакция 2,0 % водного раствора, измеренная при 25 °C: pH 7,2 ± 0,2.

Значение pH

Диапазон pH: 7,00–7,40.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивают после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч. Восстановление проводят с использованием XLD-агара (M031).

Звёздочкой обозначены соответствующие номера WDCM.

Ограничения применения

1. Разные микроорганизмы имеют различные требования к условиям роста и могут демонстрировать неодинаковую картину роста на среде.
2. Каждая серия среды проверена на микроорганизмы, указанные в сертификате анализа. При применении среды для других конкретных микроорганизмов пользователь должен самостоятельно валидировать пригодность среды с учётом своей задачи.
3. Для подтверждения результата необходимо выполнить дальнейшее обогащение и выделение культуры.

Рабочие характеристики

Рабочие характеристики среды обеспечиваются при использовании в соответствии с инструкцией на этикетке, в пределах срока годности и при хранении в рекомендованных температурных условиях.

Условия хранения и срок годности

• Температура хранения сухого продукта: 10–30 °C.
• Температура хранения приготовленной среды: 15–30 °C.
• Условия хранения: плотно закрытая ёмкость, сухое и проветриваемое помещение.
• Защита при хранении: не допускать воздействия экстремальных температур и источников воспламенения.
• После вскрытия флакон необходимо плотно закрывать и хранить продукт в сухом виде.
• Гигроскопичность продукта может привести к образованию комков; неправильное хранение повышает вероятность комкования.
• После каждого использования ёмкость следует плотно закрывать.
• Использовать продукт необходимо до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.

Меры предосторожности

Перед вскрытием ёмкости прочитайте этикетку. При работе с образцами и культурами используйте:

• защитные перчатки;
• защитную одежду;
• средства защиты глаз;
• средства защиты лица.

Соблюдайте правила надлежащей микробиологической работы и стандартные меры предосторожности при обращении с образцами и культурами. Дополнительные требования безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Утилизация

Использованные или непригодные препараты необходимо безопасно утилизировать с помощью автоклавирования и/или сжигания. Материалы, контактировавшие с образцами, должны быть обеззаражены и утилизированы в соответствии с действующими лабораторными процедурами обращения с инфекционными материалами.

Технические характеристики