HiMedia GM612A-500G Среда Сланетца и Бартли без TTC

Питательная микробиологическая среда HiMedia GM612A-500G Среда Сланетца и Бартли без TTC в гранулированной форме, с конечным pH 7,2 ± 0,2. Применяется для выявления и количественного определения энтерококков методом мембранной фильтрации или прямого посева, при этом среду нельзя автоклавировать и перегревать.

Назначение и область применения

Среда Сланетца и Бартли предназначена для выявления и количественного определения энтерококков методом мембранной фильтрации. Дополнительно может использоваться как среда для прямого посева.

Среда обладает высокой селективностью в отношении энтерококков. Азид натрия ингибирует грамотрицательные микроорганизмы.

При анализе воды мембранный фильтр с задержанными микроорганизмами помещают на поверхность чашки со средой Сланетца и Бартли. При добавлении трифенилтетразолийхлорида (TTC) красные или бордовые колонии учитывают как энтерококки при соответствующих режимах инкубации. Поскольку не все виды микроорганизмов восстанавливают TTC, необходимо учитывать также бледные колонии.

Для анализа пищевых образцов пробу гомогенизируют и разводят физиологическим раствором до получения от 15 до 150 колоний на каждой чашке Петри после поверхностного посева.

Состав

Формула скорректирована и стандартизирована в соответствии с параметрами эффективности.

Методика приготовления среды

1. Взвесьте 46,4 г среды и суспендируйте в 1000 мл дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения среды.
3. Не автоклавируйте и не перегревайте среду. Чрезмерное нагревание ухудшает её свойства.
4. Охладите приготовленную среду до 45–50 °C.
5. При необходимости добавьте в среду стерильный 1%-ный раствор TTC — реагент FD057.
6. Тщательно перемешайте.
7. Разлейте среду в стерильные чашки Петри.

Предупреждение по обращению с азидом натрия

Азид натрия способен образовывать взрывоопасные азиды металлов при контакте с материалами трубопроводов. Для удаления остатков среды и расходных материалов рекомендуется использовать достаточное количество воды для промывки канализационной системы.

Принцип действия и интерпретация результатов

Триптоза и дрожжевой экстракт служат источниками необходимых питательных веществ для микроорганизмов.

При добавлении трифенилтетразолийхлорида (TTC) соединение восстанавливается внутри бактериальной клетки до нерастворимого формазана, в результате чего образуются колонии тёмно-красного или бордового цвета.

При инкубации среды при повышенной температуре 44–45 °C все красные или бордовые колонии можно рассматривать как предположительно принадлежащие энтерококкам.

Анализ проб воды

Для определения энтерококков в воде применяют следующую процедуру:

1. Пропустите воду через мембранный фильтр.
2. Поместите мембранный фильтр на поверхность чашки Петри со средой Сланетца и Бартли, содержащей TTC.
3. Инкубируйте при 35 °C в течение 4 ч.
4. Продолжите инкубацию при 44–45 °C в течение 44–48 ч.
5. Подсчитайте красные или бордовые колонии как энтерококки.

Предварительная инкубация при 35 °C способствует восстановлению повреждённых или подвергшихся стрессу микроорганизмов. Не все виды микроорганизмов восстанавливают TTC, поэтому при подсчёте следует учитывать также бледные колонии.

Анализ пищевых образцов

1. Гомогенизируйте пищевой образец.
2. Разведите образец физиологическим раствором до получения на каждой чашке Петри от 15 до 150 колоний после поверхностного посева.
3. Инкубируйте чашки при 35 °C в течение 48 ч.
4. Подсчитайте колонии розового или тёмно-красного цвета с узкой беловатой каймой.

Контроль качества

• Внешний вид: гранулированная среда кремового или жёлтого цвета.
• Гелеобразование: плотное, сопоставимое с гелем 1,5%-ного агара.
• Цвет и прозрачность приготовленной среды: в чашках Петри образуется прозрачный гель светло-жёлтого цвета, от прозрачного до слегка опалесцирующего.
• Реакция: реакция 4,64%-ного водного раствора при 25 °C; pH 7,2 ± 0,2.
• Диапазон pH: 7,00–7,40.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики наблюдают после инкубации при 35–37 °C в течение 18–48 ч с добавлением раствора TTC FD057.

Технические характеристики

• Наименование: среда Сланетца и Бартли без TTC.
• Артикул: GM612A-500G.
• Производитель: HiMedia.
• Назначение: питательная среда для микробиологического анализа.
• Форма: гранулированная.
• Тип продукта: гранулированная среда.
• Происхождение: животного происхождения.
• Материал упаковки: HDPE (полиэтилен высокой плотности).
• Масса: 500 г.
• Конечный pH при 25 °C: 7,2 ± 0,2.
• Диапазон pH: 7,00–7,40.
• Температурный диапазон: 10–30 °C.

Хранение и срок годности

• Условия хранения сухой среды: при температуре ниже 30 °C, в плотно закрытом контейнере.
• Условия хранения приготовленной среды: 2–8 °C.
• Срок использования: до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.

Реагенты и совместимость

Для среды GM612A-500G без TTC при необходимости используется стерильный 1%-ный раствор трифенилтетразолийхлорида (TTC), реагент FD057. TTC добавляют отдельно после охлаждения среды до 45–50 °C.

В средах GM612 и GM612A/M612A TTC используется по-разному: для GM612A/M612A трифенилтетразолийхлорид добавляется отдельно в виде реагента FD057, тогда как в GM612 он является компонентом самой среды.