HiMedia GM612A-500G Среда Сланетца и Бартли без TTC

Сухая питательная среда Сланетца и Бартли без TTC HiMedia GM612A-500G в гранулированной форме. Предназначена для селективного выделения и количественного определения энтерококков методом мембранной фильтрации или прямым посевом.

Принцип измерения и интерпретация

Среда Сланетца и Бартли разработана для обнаружения и подсчета энтерококков. Триптоза и дрожжевой экстракт обеспечивают организмы необходимыми питательными веществами. Высокая селективность среды достигается за счет добавления азида натрия, который подавляет рост грамотрицательных микроорганизмов.

При добавлении в среду трифенилтетразолиум хлорида (TTC) он восстанавливается внутри бактериальной клетки до нерастворимого формазана, в результате чего колонии приобретают темно-красный цвет. При инкубации при повышенной температуре (44–45 °C) все красные или бордовые колонии считаются предполагаемыми энтерококками. Следует учитывать, что не все виды восстанавливают TTC, поэтому бледные колонии также могут быть интерпретированы как целевые.

Методика проведения анализа

Определение энтерококков в воде

Метод рекомендован Министерством здравоохранения (Department of Health) для анализа систем водоснабжения:

1. Воду фильтруют через мембранный фильтр.
2. Мембрану помещают на поверхность чашек с средой Сланетца и Бартли.
3. Инкубируют при 35 °C в течение 4 часов (для восстановления поврежденных микроорганизмов).
4. Затем инкубируют при 44–45 °C в течение 44–48 часов.
5. Красные или бордовые колонии подсчитывают как энтерококки.

Анализ пищевых продуктов

1. Образец гомогенизируют и разводят физиологическим раствором до получения 15–150 колоний на чашке.
2. Пробу распределяют по поверхности агара.
3. Инкубируют при 35 °C в течение 48 часов.
4. Подсчитывают розовые или темно-красные колонии с узким беловатым краем.

Приготовление среды

1. Суспендировать 46,4 г порошка в 1000 мл дистиллированной воды.
2. Нагреть до кипения для полного растворения компонентов.
3. Важно: не автоклавировать и не перегревать среду, так как чрезмерный нагрев вреден для её свойств.
4. Охладить до 45–50 °C.
5. При необходимости добавить стерильный 1 % раствор TTC (артикул FD057).
6. Тщательно перемешать и разлить по стерильным чашкам Петри.

Предупреждение: азид натрия может образовывать взрывоопасные азиды металлов при взаимодействии с материалами водопроводных труб. Рекомендуется использовать достаточное количество воды для промывки стоков после использования.

Технические характеристики

Состав, г/л:

Дополнительные параметры:

Контроль качества

• Внешний вид: гранулированная среда от кремового до желтого цвета.
• Желирование: плотный гель, сопоставим с 1,5 % агаром.
• Цвет и прозрачность готовой среды: светло-желтый прозрачный или слегка опалесцирующий гель в чашках Петри.
• Реакция: pH 4,64 % (масса/объем) водного раствора при 25 °C составляет 7,2 ± 0,2.
• Диапазон pH: 7,00–7,40.

Культуральные характеристики

Характеристики наблюдаются после инкубации при 35–37 °C в течение 18–48 часов с добавлением раствора TTC (FD057).

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение сухой среды: в плотно закрытом контейнере при температуре ниже 30 °C.
• Хранение готовой среды: при температуре 2–8 °C.
• Срок годности: использовать до даты, указанной на этикетке.