HiMedia GM395-500G OF базальная среда

Базальная среда HiMedia GM395-500G OF (гранулированная) для дифференциации грамотрицательных бактерий на основе их окислительного и ферментативного метаболизма углеводов. Применяется для анализа клинических и неклинических образцов; вес упаковки составляет 500 г.

Принцип измерения

Среда разработана по методу Хью и Лейфсона (Hugh and Leifson) для изучения метаболизма углеводов грамотрицательными бактериями, что является важным критерием при таксономических исследованиях семейства Enterobacteriaceae.

Триптон обеспечивает необходимые углерод, азот и витамины для роста бактерий. Фосфатный буфер стабилизирует pH, а низкая концентрация агара позволяет определять подвижность микроорганизмов и обеспечивает равномерное распределение вырабатываемой кислоты по поверхности. Бромтимоловый синий служит pH-индикатором: при расщеплении углеводов до кислоты цвет среды меняется с зеленого на желтый.

Интерпретация результатов:

• Ферментативный метаболизм: кислотная реакция (пожелтение) наблюдается как в открытой пробирке, так и в пробирке, закрытой стерильным минеральным маслом (без доступа кислорода).
• Окислительный метаболизм: кислотная реакция наблюдается только в открытой пробирке; в закрытой пробирке наблюдается слабый рост без изменения цвета.
• Отсутствие метаболизма: в закрытой пробирке нет изменений, в открытой — щелочная реакция.

Состав

Состав, г/л:

Методика проведения анализа

Приготовление среды

1. Растворить 9,38 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагреть до кипения для полного растворения компонентов.
3. Разлить по 100 мл в емкости и стерилизовать в автоклаве при температуре 121 °C (давление $\approx$ 0,1 МПа) в течение 15 минут.

Подготовка к инокуляции

К стерильной базальной среде асептически добавляют растворы углеводов (10% концентрации):

• Для определения метаболизма декстрозы: добавить 10 мл 10% раствора декстрозы на 100 мл среды.
• Для определения метаболизма лактозы: добавить 10 мл 10% раствора лактозы на 100 мл среды.
• Для определения метаболизма сахарозы: добавить 10 мл 10% раствора сахарозы на 100 мл среды.

Смешать и разлить по 5 мл в стерильные пробирки в двух экземплярах (для аэробного и анаэробного анализа).

Процедура анализа

1. Произвести инокуляцию путем глубокого посева (прокола) в две пробирки с одним и тем же углеводом.
2. Одну пробирку закрыть 2 мл стерильного минерального масла для исключения доступа кислорода, вторую оставить открытой.
3. Инкубировать при температуре 35–37 °C в течение 18–48 часов или дольше.
4. Считать результаты через 48 часов.

Технические характеристики

• Вес: 500 г
• Форма выпуска: гранулированный порошок
• Цвет готовой среды: зеленый, от прозрачного до слегка опалесцирующего геля
• pH (водного раствора 0,94% при 25 °C): 6,8 ± 0,2
• Диапазон pH: 6,60–7,00
• Консистенция: полутвердая (сопоставима с 0,2% агаровым гелем)
• Происхождение компонентов: животное
• Материал упаковки: ПНД (полиэтилен низкого давления)

Область применения

Среда используется для работы с изолированными микроорганизмами из клинических и неклинических образцов, включая пищевые и молочные продукты.

Ограничения и дополнения

• Поскольку среда зависит от pH, необходимо контролировать этот параметр.
• Для роста некоторых требовательных организмов среду можно дополнить 2 % сыворотки или 0,1 % экстракта дрожжей.

Культуральные характеристики

Характеристики учитывают после инкубации при 35–37 °C в течение 18–48 часов.

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение порошка: в плотно закрытом контейнере при температуре 10–30 °C в сухом вентилируемом месте, вдали от источников возгорания. Из-за гигроскопичности продукта необходимо плотно закрывать крышку во избежание комкования.
• Хранение готовой среды: при температуре 2–8 °C.
• Утилизация: использованные или непригодные препараты подлежат обязательному автоклавированию или сжиганию. Материалы, контактировавшие с клиническими образцами, должны быть деконтаминированы согласно лабораторным протоколам.