HiMedia GM181-500G SIM среда

Гранулированная среда HiMedia GM181-500G SIM для определения продукции сероводорода, образования индола и подвижности энтеробактерий. Применяется для дифференциации бактерий семейства Enterobacteriaceae, в частности родов Salmonella и Shigella; вес упаковки составляет 500 г.

Принцип измерения

Среда SIM позволяет одновременно определить три характеристики энтеробактерий:

1. Продукция H₂S: пептизированное железо и тиосульфат натрия служат индикаторами. Сероводород (H₂S) реагирует с пептизированным железом, образуя черный осадок сульфида железа (II). Подвижные организмы усиливают эту реакцию.
2. Подвижность: благодаря полужидкой консистенции среды (низкое содержание агара) подвижные микроорганизмы распространяются от линии инокуляции, создавая диффузный рост или помутнение всей среды. Неподвижные организмы растут строго вдоль линии посева.
3. Образование индола: триптофан, содержащийся в пептоне, расщепляется специфическими бактериями с образованием индола. Его наличие определяется после инкубации путем добавления химического реагента (реактива Ковача).

Пептон и HM-пептон B обеспечивают необходимые азотсодержащие и углеродные соединения, длинноцепочечные аминокислоты, витамины и другие питательные вещества.

Методика проведения анализа

1. Подготовка среды: суспендируйте 36,23 г порошка в 1000 мл дистиллированной воды. Нагрейте до кипения для полного растворения. Разлейте по пробиркам.
2. Стерилизация: стерилизуйте в автоклаве при температуре 121 °C (давление ≈0,1 МПа) в течение 15 минут. Охладите пробирки в вертикальном положении.
3. Посев: введите чистую культуру-изолят с помощью прямой иглы одним глубоким проколом (stab) через центр среды.
4. Инкубация и оценка:
   • Оцените подвижность (диффузный рост от линии прокола или общая мутность среды).
   • Оцените продукцию H₂S (почернение среды).
   • Для определения индола добавьте 3–4 капли реактива Ковача. Появление красного кольца на границе раздела сред свидетельствует о положительной реакции. Примечание: подвижность и продукцию H₂S следует определять до проведения теста на индол.

Технические характеристики

Состав, г/л:

Общие параметры:

• Происхождение компонентов: животное
• Тип продукта: гранулированная среда
• Физическая форма: гранулы
• Материал упаковки: ПНД (HDPE)
• Внешний вид: однородная гранулированная среда от кремового до бежевого цвета
• Желирование: полужидкое (сопоставимо с 0,3% агаровым гелем)
• Цвет и прозрачность готовой среды: янтарный, слегка опалесцирующий гель в пробирках (столбик)
• Диапазон pH: 7,10–7,50

Культуральные характеристики

Характеристики учитывают после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч.

Область применения и ограничения

Среда предназначена для работы с чистыми культурами-изолятами. Является средой общего назначения и может не поддерживать рост требовательных (fastidious) микроорганизмов.

Условия эксплуатации и хранения

• Температура хранения сухой среды: 10–30 °C в плотно закрытом контейнере.
• Температура хранения готовой среды: 2–8 °C.
• Особенности: продукт гигроскопичен; после вскрытия флакон необходимо плотно закрывать для предотвращения комкования. Хранить в сухом вентилируемом помещении, вдали от источников возгорания и экстремальных температур.

Меры предосторожности и утилизация

• При работе использовать защитные перчатки, одежду и средства защиты глаз/лица.
• Соблюдать стандартные правила микробиологической безопасности.
• Контаминированные материалы и использованные среды подлежат обязательной стерилизации в автоклаве или сжиганию перед утилизацией.