Buffered Peptone Water, granulated HiMedia GM1494I-500G (500 г)

Гранулированная буферизованная пептонная вода Buffered Peptone Water, granulated HiMedia GM1494I-500G (500 г) производства HiMedia. Рекомендуется в качестве среды для предварительного обогащения микроорганизмов семейства Enterobacteriaceae, включая виды Salmonella и Cronobacter, из пищевых продуктов, кормов для животных, воды и молока.

Принцип измерения

Микроорганизмы, подвергшиеся воздействию факторов окружающей среды, могут получить структурные или метаболические повреждения. Такие поврежденные клетки не способны к репликации в селективных средах, поэтому требуется их реанимация и восстановление в подходящей неселективной среде. Буферизованная пептонная вода обеспечивает такие условия, а буферная система предотвращает повреждение бактерий вследствие изменения pH среды. Среда также рекомендована APHA и FDA BAM для предварительного обогащения Salmonella, Cronobacter и Listeria.

Область применения

Среда используется для анализа следующих типов образцов:

• пищевые продукты, включая молоко и молочные продукты;
• корма для животных;
• фекалии животных;
• вода;
• образцы окружающей среды на этапе первичного производства.

Среда также применяется в качестве разбавителя для количественного определения всех микроорганизмов.

Методика проведения анализа

Приготовление среды

1. Суспендировать 20,07 г гранулированной среды в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. При необходимости нагреть для полного растворения компонентов.
3. Разлить по емкостям и стерилизовать в автоклаве при температуре 121 °C (давление $\approx$ 0,1 МПа / 15 psi) в течение 15 минут.

Процедуры анализа по стандартам ISO

Согласно ISO 6579-1:2017

1. Предварительное обогащение: образцы (25 г в 225 мл среды) инкубируют при температуре 34–38 °C в течение 18 $\pm$ 2 ч.
2. Селективное обогащение: 0,1 мл предварительно обогащенного образца инокулируют в 10 мл бульона RVS (M14481) или агар MSRV (M1428) и инкубируют при 41,5 $\pm$ 1 °C в течение 24 $\pm$ 3 ч; 1 мл культуры инокулируют в бульон MKTTn (M14961) и инкубируют при 37 $\pm$ 1 °C в течение 24 $\pm$ 3 ч.
3. Изоляция: полученную культуру высевают на модифицированный агар XLD (M0311) и инкубируют при 37 $\pm$ 1 °C в течение 24 $\pm$ 3 ч. Параллельно проводят посев на второй изоляционный агар.
4. Подтверждение: выполнение биохимических и серологических тестов.

Согласно ISO 21528-1:2017

1. Предварительное обогащение: образцы (10 г в 90 мл среды) инкубируют при 37 $\pm$ 1 °C в течение 18 $\pm$ 2 ч.
2. Изоляция: культуру высевают на агар с виолевым красным, желчью и глюкозой (VRBG) (M1684) и инкубируют при 37 $\pm$ 1 °C в течение 24 $\pm$ 2 ч.
3. Подтверждение: биохимические и серологические тесты.

Согласно ISO 22964:2017

1. Предварительное обогащение: образцы (10 г в 90 мл среды) инкубируют при 34–38 °C в течение 18 $\pm$ 2 ч.
2. Селективное обогащение: 0,1 мл культуры инокулируют в 10 мл селективного бульона для Cronobacter (M17861) и инкубируют при 41,5 $\pm$ 1 °C в течение 24 $\pm$ 2 ч.
3. Изоляция: культуру высевают на изоляционный агар HiCrome® Cronobacter (CCI Agar) (M2062I) и инкубируют при 41,5 $\pm$ 1 °C в течение 24 $\pm$ 2 ч.
4. Подтверждение: биохимические и серологические тесты.

Согласно ISO 19250:2010

1. Неселективное предварительное обогащение: инокулируют 50 мл среды при комнатной температуре образцом или его разбавлениями, инкубируют при (36 $\pm$ 2) °C в течение (18 $\pm$ 2) ч.
2. Селективное обогащение: 0,1 мл культуры переносят в 10 мл бульона RVS (M1448I) и инкубируют при 41,5 $\pm$ 1 °C в течение 24 $\pm$ 3 ч; 1 мл культуры инокулируют в бульон MKTTn (M14961) и инкубируют при 36 $\pm$ 2 °C в течение 24 $\pm$ 3 ч.
3. Подтверждение: посев на модифицированный агар XLD (M031I) и инкубация при 36 $\pm$ 2 °C в течение 24 $\pm$ 3 ч. Параллельно проводят посев на второй изоляционный агар.

Технические характеристики

Состав (ISO 6579-1:2017, ISO 6887-1:2017, ISO 21528-1:2017, ISO 22964:2017)

Состав (Buffered Peptone Water, Granulated® GM14941)

Общие параметры

Культуральные характеристики

Восстановление (ISO 6887-1:2017)

Восстановление $\pm$ 30 % от исходного числа (на агаре сое-триптоне Tryptone Soya Agar, M290). Время выдержки инокулированного образца: 45–60 мин при 20–25 °C. Инкубация чашек при 37 $\pm$ 2 °C в течение 18 $\pm$ 2 ч.

Восстановление (ISO 6887-1:2017, вариант 2)

Время выдержки инокулированного образца: 1 ч $\pm$ 5 мин при 20 $\pm$ 2 °C. Инкубация чашек при 37 $\pm$ 2 °C в течение 18 $\pm$ 2 ч.

Продуктивность (ISO 6579-1:2017 и ISO 21528-1:2017)

Инкубация при 34–38 °C в течение 18 $\pm$ 2 ч.

Продуктивность (ISO 22964:2017)

Инкубация при 34–38 °C в течение 18 $\pm$ 2 ч.

Продуктивность (ISO 19250:2010)

Инкубация при 36 $\pm$ 2 °C в течение 24 $\pm$ 3 ч.

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение сухой среды: в плотно закрытом контейнере при температуре 10–30 °C.
• Хранение приготовленной среды: при температуре 20–30 °C.
• Особенности: продукт гигроскопичен, неправильное хранение может привести к образованию комков. Хранить в сухом вентилируемом помещении, вдали от источников возгорания и экстремальных температур.

Ограничения и предостережения

• Различные микроорганизмы могут иметь разные требования к росту и демонстрировать вариативные паттерны роста в данной среде.
• Рекомендуется валидировать среду для конкретных микроорганизмов, не указанных в сертификате анализа (COA), исходя из уникальных требований пользователя.
• Для окончательного подтверждения необходимо проведение дальней