HiMedia GM1385-500G Среда Брайанта и Берки

Гранулированная питательная среда HiMedia GM1385-500G Среда Брайанта и Берки с конечным pH 5,9 ± 0,2. Среда предназначена для выявления и количественного определения спор молочнокислых и газообразующих клостридий в молоке и молочных продуктах; приготовленная среда требует анаэробных условий инкубации при 35–37 °C в течение 6–7 суток.

Назначение

Среда Брайанта и Берки в гранулированной форме применяется для выявления и количественного определения спор молочнокислых клостридий в молоке и молочных продуктах.

Среда используется для определения количества спор газообразующих клостридий, вызывающих вспучивание сыров в молочной промышленности. В обычных условиях применения среда также обеспечивает рост других микроорганизмов, не связанных непосредственно с порчей сыра, включая Clostridium sporogenes и Clostridium butyricum.

Споры клостридий устойчивы к нагреванию и могут загрязнять рассолы для сыров. Газ, образующийся при росте клостридий, вызывает вспучивание сыра и дефект, известный как маслянокислое вспучивание, сопровождающийся появлением неприятного вкуса. Основной вид, вызывающий этот дефект, — Clostridium tyrobutyricum.

Состав

Состав, г/л:

Формула скорректирована и стандартизирована в соответствии с параметрами эффективности среды.

Методика приготовления

1. Суспендируйте 33,0 г среды в 1000 мл дистиллированной воды, содержащей 5 г лактата натрия.
2. При необходимости нагревайте до полного растворения среды.
3. Разлейте среду по пробиркам или в требуемую лабораторную посуду.
4. Стерилизуйте автоклавированием при температуре 121 °C в течение 15 мин и давлении 15 фунтов/дюйм² (≈0,10 МПа).

Методика определения Clostridium

Для оценки содержания Clostridium рекомендуется определять количество спор методом наиболее вероятного числа (MPN).

1. Предварительно деконтаминируйте исследуемую пробу нагреванием при 75 °C в течение 10 мин. Такая обработка уничтожает вегетативные формы микроорганизмов, сохраняя жизнеспособными споры.
2. Пробирки со средой прокипятите для восстановления анаэробных условий.
3. Охладите пробирки до 25–30 °C.
4. Внесите исследуемую пробу в пробирки со средой.
5. Налейте поверх среды слой стерильного парафина толщиной 2 см.
6. Инкубируйте пробирки в течение до 7 суток при 37 °C в анаэробных условиях.
7. Осматривайте пробирки каждые 48 ч.
8. Приподнятая парафиновая пробка указывает на образование газа.
9. Пробирки считают положительными при явном газообразовании.
10. Для расчёта количества Clostridia используют индекс MPN.

Принцип действия и интерпретация

Резазурин является окислительно-восстановительным индикатором и контролирует содержание кислорода: в аэробных условиях он приобретает розовую окраску, а в анаэробных условиях становится бесцветным.

Питательный состав базовой среды, в особенности ферментативный гидролизат казеина, дрожжевой экстракт, мясной экстракт и L-цистеина гидрохлорид, способствует быстрому росту видов Clostridium.

Ацетат натрия стимулирует прорастание спор и повышает селективность среды. Лактат натрия ферментируется в анаэробных условиях бактериями вида Clostridium tyrobutyricum.

Розовая окраска указывает на присутствие кислорода в среде; при кипячении среда становится бесцветной.

Контроль качества

Внешний вид

Гранулированная среда от кремового до жёлтого цвета.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

При нагревании — прозрачный раствор светло-янтарного цвета; после охлаждения раствор приобретает розово-красную окраску.

Реакция

Реакция водного раствора с массово-объёмной концентрацией 3,3 % при 25 °C:

• pH: 5,9 ± 0,2

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определены в анаэробных условиях после инкубации при 35–37 °C в течение 6 суток.

Технические характеристики

• Назначение изделия: среда
• Масса: 500 г
• Температурный диапазон: 10–30 °C
• Конечный pH при 25 °C: 5,9 ± 0,2

Условия хранения и срок годности

• Условия хранения сухой среды: при температуре ниже 30 °C в плотно закрытом контейнере.
• Условия хранения приготовленной среды: 2–8 °C.
• Срок использования: до даты истечения срока годности, указанной на этикетке.