Жидкая тетратионатная среда (без иода и бриллиантового зеленого) HiMedia GM032-500G (500 г)

Жидкая тетратионатная среда (без иода и бриллиантового зеленого) HiMedia GM032-500G (500 г) — гранулированная селективная среда без иода и бриллиантового зелёного в исходной форме. Среда предназначена для селективного обогащения и выделения сальмонелл из пищевых продуктов и патологического материала; приготовленную основу не автоклавируют.

Назначение

Жидкая тетратионатная среда предназначена для селективного обогащения при выделении сальмонелл из пищевых продуктов и других патологических материалов.

Сальмонеллы широко распространены в окружающей среде и обычно присутствуют в образцах в меньшем количестве по сравнению с колиформными микроорганизмами, поэтому для их выделения требуется исследование относительно большого объёма пробы. Сальмонеллы в пищевых образцах могут быть сублетально повреждены на различных этапах переработки пищевых продуктов вследствие воздействия низких температур, нагревания, высушивания, радиации и различных химических веществ. Повреждённые клетки способны вызывать порчу продуктов и заболевания при попадании в организм в благоприятных условиях, поэтому перед количественным определением требуется восстановление повреждённых бактерий.

Жидкая тетратионатная среда с добавлением растворов иода и бриллиантового зелёного применяется для селективного обогащения сальмонелл, включая Salmonella Typhi, из кала, мочи, пищевых продуктов и других материалов санитарного значения.

Состав

Состав, г/л:

Формула скорректирована и стандартизирована в соответствии с параметрами эффективности.

Принцип действия и интерпретация

Среда первоначально разработана по формуле Мюллера и рекомендована Американской ассоциацией общественного здравоохранения (APHA) для обогащения сальмонелл.

За счёт добавления иода и йодида калия в среде образуется тетратионат. В среде растут микроорганизмы, обладающие ферментом тетратионатредуктазой.

Триптон и пептон служат источниками углерода, азота, витаминов и минеральных веществ. Желчные соли подавляют сопутствующие грамположительные микроорганизмы. Селективность обеспечивается способностью тиосульфата и тетратионата в комбинации подавлять комменсальные колиформные микроорганизмы. Карбонат кальция нейтрализует кислые продукты разложения тетратионата. Бриллиантовый зелёный дополнительно повышает селективность в отношении сальмонелл за счёт ингибирования сопутствующей микрофлоры.

Для дальнейшего подтверждения обогащённые культуры после инкубации высевают штриховым методом на чашки с селективными средами:

• агар с бриллиантовым зелёным (M016);
• агар МакКонки (M081);
• висмут-сульфитный агар (M027).

Методика приготовления и проведения анализа

1. Суспендируйте 46,0 г среды в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте суспензию только до кипения.
3. Не автоклавируйте приготовленную основу.
4. Охладите среду до температуры ниже 45 °C.
5. Добавьте 20 мл раствора иода, приготовленного из 6 г иода и 5 г йодида калия в 20 мл дистиллированной воды.
6. Добавьте 10 мл 0,1%-ного раствора бриллиантового зелёного.
7. Тщательно перемешайте.
8. Разлейте среду порциями по 10 мл.
9. Используйте готовую среду в день приготовления. Стерилизованная основа бульона может храниться некоторое время.
10. После добавления раствора иода не нагревайте среду.
11. Используйте среду сразу после добавления иода.
12. Асептически внесите исследуемый образец в жидкую тетратионатную среду с добавленными растворами иода и бриллиантового зелёного.
13. Инкубируйте при 35–37 °C в течение 18–24 ч.
14. После инкубации выделите микроорганизмы на чашках с селективными средами.

Для процедур обогащения и выделения следует применять соответствующие стандартные лабораторные методики.

Особенности приготовленной среды

Из-за присутствия карбоната кальция приготовленная среда образует опалесцирующий раствор с белым осадком.

Полная среда с добавленными растворами бриллиантового зелёного и иода имеет светло-зелёный цвет; раствор опалесцирующий, с обильным белым осадком, который при отстаивании оседает.

Типы образцов

• Клинические образцы: кал, моча, другие материалы санитарного значения.
• Пищевые образцы.

Сбор и обращение с образцами

Для клинических образцов применяйте соответствующие методы обращения с образцами в соответствии с установленными руководствами.

Для пищевых и молочных образцов применяйте соответствующие методы отбора и обработки проб в соответствии с руководствами.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Технические характеристики

Контроль качества

Внешний вид

Белый или кремовый гранулированный легко пересыпающийся порошок.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяют после обогащения в тетратионатной среде с добавленными растворами бриллиантового зелёного и иода, последующего пересева на агар МакКонки (M081) и инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч.

* Соответствующие номера WDCM.

Ожидаемые эксплуатационные характеристики среды обеспечиваются при применении в соответствии с инструкцией на этикетке, в пределах срока годности и при хранении при рекомендованной температуре.

Ограничения применения

Для дальнейшего подтверждения обогащённые культуры после инкубации необходимо высевать на чашки с агаром с бриллиантовым зелёным (M016), агаром МакКонки (M081) и висмут-сульфитным агаром (M027).

Условия хранения и срок годности

• Температура хранения: 10–30 °C.
• Условия хранения: в плотно закрытой ёмкости.
• Среду следует готовить непосредственно перед использованием.
• Использовать до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.
• После вскрытия флакон необходимо плотно закрывать и хранить продукт в сухом состоянии, чтобы предотвратить образование комков вследствие гигроскопичности.
• Неправильное хранение может привести к образованию комков.
• Хранить в сухом проветриваемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения.
• После использования плотно закрывать ёмкость.
• Наилучшие рабочие характеристики обеспечиваются при использовании в пределах установленного срока годности.

Предупреждения и меры предосторожности

• Для применения in vitro.
• Только для профессионального использования.
• Перед открыванием контейнера прочитайте этикетку.
• При работе с образцами и культурами используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• Соблюдайте правила надлежащей микробиологической лабораторной практики.
• При обращении с клиническими образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности.
• Указания по безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Утилизация

Пользователь должен