Жидкая цистин-селенитовая среда (двойная упаковка) HiMedia GM025-500G (500 г)

Жидкая цистин-селенитовая среда HiMedia GM025-500G (двойная упаковка) для изоляции Salmonellae в пищевых продуктах, молочных продуктах и клинических образцах. Селективная обогащающая среда в гранулированной форме с массой 500 г.

Принцип измерения и интерпретация

Среда представляет собой модификацию формулы Лейфсона с добавлением L-цистина. Она разработана для обеспечения пролиферации видов Salmonella при одновременном подавлении роста конкурирующей несальмонелльной микрофлоры.

Основные компоненты и их функции:

• Триптон: источник азотистых веществ.
• Лактоза: ферментируемый углевод; в процессе ферментации бактериями вырабатываются кислоты, которые поддерживают нейтральный pH среды. Это необходимо, так как при восстановлении селенита в процессе роста бактерий образуется щелочь, повышающая pH, что снижает токсичность селенита и может привести к избыточному росту посторонней флоры.
• Фосфат: стабилизирует pH и снижает токсичность селенита.
• L-цистин: восстановитель, улучшающий извлечение Salmonella.

Среда эффективна для обнаружения Salmonella на неострых стадиях заболевания (при низком содержании микроорганизмов в фекалиях), в эпидемиологических исследованиях, а также для восстановления поврежденных клеток, подвергшихся воздействию низких температур, сушки, радиации или консервантов.

Область применения

Применяется для анализа следующих типов образцов:

• Клинические образцы: фекалии.
• Пищевые и молочные продукты.

Методика приготовления и использования

Приготовление среды

Среда поставляется в двух частях (A и B).

1. Растворите 4,0 г части B в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Добавьте 19,01 г части A.
3. Тщательно перемешайте и прогрейте до полного растворения компонентов.
4. Разлейте по стерильным пробиркам.
5. Стерилизуйте в кипящей водяной бане или потоком насыщенного пара в течение 10 минут.

Важно:

• НЕ АВТОКЛАВИРОВАТЬ. Чрезмерный нагрев губителен для среды.
• Утилизируйте приготовленную среду, если наблюдается значительное восстановление селенита (признаком является красный осадок на дне пробирки или флакона).

Примечание: Вместо части B можно использовать диски с биселенитом натрия DD056 (1 диск на 10 мл среды) или гранулы биселенита натрия DB001 (1 гранула на 100 мл среды), добавляя их после кипячения.

Процедура анализа

1. Посейте образец пищевого продукта в рекомендованный бульон для предварительного обогащения.
2. Перенесите 1 мл смеси в 10 мл жидкой цистин-селенитовой среды, а также в 10 мл тетратионатного бульона (M032).
3. Инкубируйте пробу.
4. Ограничение по времени: не инкубируйте бульон более 24 часов, так как ингибирующий эффект селенита снижается через 6–12 часов инкубации.
5. Выполните пересев на плотные селективные среды: висмут-сульфитный агар (M027), ксилозо-лизин-дезоксихолатный агар (M031), гектоэн-энтерический агар (M467) или агар МакКонки (M081).

Технические характеристики

Состав (г/л)

Общие параметры

Контроль качества

Внешний вид и реакция

• Часть A: однородная гранулированная среда от кремового до желтого цвета.
• Часть B: однородный свободнотекущий порошок от белого до кремового цвета.
• Готовая среда: светло-желтый, прозрачный или слегка опалесцирующий раствор.
• pH (при 25 °C): 6,80–7,20.

Культуральные характеристики

Результаты после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч при пересеве на XLD-агар (M031):

Результаты после инкубации при 35–37 °C в течение 24 ч при пересеве на соево-казеиновый агар с триптоном (M290):

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение сухой среды: в плотно закрытом контейнере при температуре 10–30 °C в сухом проветриваемом помещении, вдали от источников возгорания. Из-за гигроскопичности продукта необходимо плотно закрывать крышку для предотвращения комкования.
• Хранение готовой среды: при температуре 2–8 °C.
• Утилизация: загрязненные материалы и использованные среды должны быть стерилизованы в автоклаве или подвергнуты инсинерации перед утилизацией.

Ограничения и меры предосторожности

• Ограничения: некоторые организмы могут демонстрировать слабый рост из-за вариативности их трофических потребностей. Для окончательной идентификации необходимо проведение серологических и биохимических тестов.
• Меры безопасности: только для профессионального использования в In Vitro диагностике. При работе использовать защитные перчатки, одежду и средства защиты глаз/лица. Соблюдать стандартные правила микробиологической безопасности при работе с клиническими образцами.