Жидкая цистин-селенитовая среда (двойная упаковка) HiMedia GM025-500G (500 г)

Жидкая цистин-селенитовая среда (двойная упаковка) HiMedia GM025-500G (500 г) — гранулированная селективная обогатительная среда для выделения Salmonella из пищевых продуктов, молочных продуктов, материалов санитарного значения и клинических образцов. Среда предназначена для профессиональных микробиологических лабораторий; готовый раствор стерилизуют кипящей водяной баней или текучим паром 10 мин, автоклавирование запрещено.

Назначение

Среда применяется для обогащения и выделения Salmonella из:

• пищевых продуктов;
• молочных продуктов;
• материалов санитарного значения;
• клинических образцов, включая фекалии.

Среда предназначена для профессионального применения in vitro.

Состав

Формула скорректирована и стандартизирована в соответствии с параметрами эффективности.

Принцип действия и интерпретация

Селективное ингибирующее действие селенита было впервые продемонстрировано Klett. Guth применил селенит для выделения Salmonella Typhi. Leifson исследовал селенит и разработал среду с его использованием. Жидкая цистин-селенитовая среда представляет собой модификацию формулы Leifson с добавлением цистина.

Формуляция соответствует составу, рекомендованному AOAC для выявления Salmonella в пищевых продуктах, особенно в яичных продуктах. Среда также рекомендована APHA и USP как компонент методик микробиологического анализа.

Цистин-селенитовый бульон применяют для выявления Salmonella при нетяжёлых стадиях заболевания, когда количество микроорганизмов в фекалиях невелико, а также в эпидемиологических исследованиях для повышения вероятности обнаружения небольшого количества микроорганизмов у бессимптомных пациентов и пациентов в период выздоровления.

Salmonella может повреждаться при различных технологических операциях обработки пищевых продуктов, включая воздействие низких температур, недостаточного нагревания, высушивания, радиации, консервантов и санитарно-дезинфицирующих средств. При наличии повреждённых клеток и низкой концентрации Salmonella выделение микроорганизмов из пищевой пробы включает предварительное обогащение, селективное обогащение и селективный высев.

Жидкая цистин-селенитовая среда используется как селективная обогатительная среда для культивирования видов Salmonella. Состав обеспечивает размножение Salmonella и одновременно подавляет рост конкурирующих микроорганизмов, не относящихся к Salmonella.

Функции компонентов:

• триптон поставляет азотсодержащие вещества;
• лактоза является сбраживаемым углеводом и поддерживает pH среды при восстановлении селенита в процессе бактериального роста и образовании щёлочи;
• повышение pH снижает токсичность селенита и приводит к избыточному росту других бактерий;
• кислота, образующаяся при сбраживании лактозы, поддерживает нейтральный pH;
• фосфат стабилизирует pH и также снижает токсичность селенита;
• L-цистин является восстановителем и повышает эффективность восстановления Salmonella.

После обогащения бульон пересеивают на твёрдую питательную среду. Инкубировать бульон более 24 ч не следует, поскольку ингибирующее действие селенита снижается через 6–12 ч инкубации.

Методика приготовления среды

1. Приготовьте суспензию из 4,0 г части B в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Добавьте 19,01 г части A.
3. Тщательно перемешайте.
4. Нагревайте до полного растворения среды.
5. Разлейте среду по стерильным пробиркам.
6. Стерилизуйте на кипящей водяной бане или текучим паром в течение 10 мин.
7. Не автоклавируйте приготовленную среду. Чрезмерный нагрев ухудшает её свойства.
8. Утилизируйте приготовленную среду, если произошло значительное восстановление селенита, на что указывает красный осадок на дне пробирки или флакона.

Вместо части B после кипячения в среду можно добавить диски биселенита натрия DD056 из расчёта 1 диск на 10 мл среды или гранулу биселенита натрия DB001 из расчёта 1 гранула на 100 мл среды.

Методика обогащения и высева

1. Инокулируйте пищевую пробу в рекомендованный бульон предварительного обогащения.
2. Перенесите 1 мл полученной смеси в 10 мл жидкой цистин-селенитовой среды.
3. Параллельно перенесите 1 мл смеси в 10 мл тетратионатного бульона M032.
4. Инкубируйте среды.
5. Выполните последующий пересев на одну или несколько селективных твёрдых сред:
   • висмут-сульфитный агар M027;
   • ксилозо-лизин-дезоксихолатный агар M031;
   • энтерический агар Хектоена M467;
   • агар МакКонки M081.

Тип образцов

• Клинические образцы: фекалии.
• Пищевые и молочные образцы.

Отбор и обращение с образцами

• При работе с клиническими образцами соблюдайте соответствующие методы обращения с образцами согласно установленным руководствам.
• При отборе и обработке пищевых и молочных образцов соблюдайте соответствующие методы согласно действующим руководствам.
• После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Предупреждения и меры предосторожности

• Перед вскрытием контейнера прочитайте маркировку.
• При работе с образцами и культурами соблюдайте правила надлежащей микробиологической лабораторной практики.
• При обращении с клиническими образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности согласно установленным руководствам.
• Используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• Требования безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.
• Среда предназначена только для профессионального применения в диагностике in vitro.

Ограничения

• Некоторые микроорганизмы могут демонстрировать слабый рост из-за различий в их потребностях в питательных веществах.
• Для полной идентификации необходимо выполнить дополнительные серологические и биохимические исследования.

Контроль качества

Внешний вид

• Часть A: однородная гранулированная среда от кремового до жёлтого цвета.
• Часть B: однородный свободно текучий порошок от белого до кремового цвета.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

Готовая полная среда представляет собой прозрачный или слегка опалесцирующий раствор светло-жёлтого цвета.

Реакция среды

Реакция среды для состава из 1,9 % (масс./об.) части A и 0,4 % (масс./об.) части B при 25 °C:

• pH: 7,0 ± 0,2.

Диапазон pH

Диапазон pH: 6,80–7,20.

Культуральные характеристики на агаре XLD

Культуральные характеристики определяют после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч с последующим пересевом на агар XLD M031.

Культуральные характеристики на триптон-соевом агаре

Культуральные характеристики определяют после инкубации при 35–37 °C в течение 24 ч с последующим пересевом на триптон-соевый агар M290.

Технические характеристики

Условия хранения и срок годности

• Хранение сухого продукта: при 10–30 °C в плотно закрытом контейнере.
• Хранение приготовленной среды: при 2–8 °C.
• Использ