Бакпечатки HiTouch для обнаружения P.aeruginosa HiMedia FL014-50РТ (50 чашек d 55 мм)

Бактериологические контактные пластинки Бакпечатки HiTouch для обнаружения P.aeruginosa HiMedia FL014-50РТ (50 чашек d 55 мм), производитель HiMedia, предназначены для подсчёта Pseudomonas aeruginosa и имеют диаметр 55 мм. Бакпечатки применяются для микробиологического контроля косметических средств, клинических образцов, воды, пищевых и фармацевтических объектов, а сетчатая разметка позволяет непосредственно определять количество колоний на 1 см².

Назначение и область применения

Бакпечатки HiTouch FL014-50РТ предназначены для количественного определения и предполагаемого выявления Pseudomonas aeruginosa методом контактного посева на селективную питательную среду.

Области применения:

• исследование косметических средств;
• анализ клинических образцов;
• микробиологический контроль пищевой и фармацевтической продукции;
• контроль молочной продукции;
• исследования в больницах;
• контроль воды и объектов водоснабжения;
• экологический микробиологический контроль;
• оценка эффективности дезинфицирующих средств в отношении Pseudomonas aeruginosa.

Тип питательной среды: элективный.

Назначение изделия: бакпечатки.

Сертификат: ФСЗ 2009/03706.

Пластинки поставляются стерильными и полностью готовыми к проведению бактериологического анализа. Гибкая конструкция обеспечивает плотный контакт с ровными и неровными поверхностями. Разметка на основании позволяет непосредственно подсчитывать колонии и определять их количество на 1 см².

Принцип действия и интерпретация результатов

Pseudomonas aeruginosa хорошо растёт на стандартных лабораторных питательных средах, однако специфическое выделение микроорганизма из объектов окружающей среды, клинических образцов, материалов животного и растительного происхождения проводят на среде, содержащей селективный агент и компоненты, стимулирующие образование характерных пигментов.

Цетримид подавляет рост многих микроорганизмов и позволяет развиваться колониям Pseudomonas aeruginosa. Цетримид представляет собой четвертичную соль аммония, действующую как катионное поверхностно-активное вещество: он снижает поверхностное натяжение в точке контакта, оказывает осаждающее, комплексообразующее и денатурирующее воздействие на белки бактериальных мембран. Цетримид также ингибирует широкий спектр микроорганизмов, включая виды рода Pseudomonas, отличные от Pseudomonas aeruginosa.

Среда A, разработанная King и соавторами, предназначена для усиления образования пиоцианина бактериями рода Pseudomonas. Цетримидный агар, разработанный Lowburry, представляет собой модификацию технического агара, или среды A, с добавлением 0,1 % цетримидина для селективного выделения Pseudomonas aeruginosa. После появления высокоочищенного цетримидина его концентрация в среде была снижена.

Панкреатический перевар желатина обеспечивает Pseudomonas aeruginosa необходимыми питательными веществами. Хлорид натрия поддерживает осмотическое равновесие среды. Хлорид магния и сульфат калия стимулируют образование пиоцианина.

Идентификацию проводят с учётом:

• морфологии колоний;
• образования пиоцианина — синего водорастворимого нефлуоресцирующего феназинового пигмента, окрашивающего среду в сине-зелёный цвет;
• образования пиовердина — жёлто-зелёного флуоресцирующего пигмента;
• образования пиорубина — пигмента бурого цвета;
• характерного запаха винограда, связанного с аминоацетофеноном;
• флуоресценции колоний в ультрафиолетовом свете.

Pseudomonas aeruginosa считается единственным видом рода Pseudomonas и известной грамотрицательной палочкой, выделяющей пиоцианин. Колонии могут иметь синюю, сине-зелёную или неокрашенную пигментацию. Колонии, демонстрирующие флуоресценцию при 250 нм и сине-зелёную пигментацию, рассматриваются как предположительно положительные.

Pseudomonas aeruginosa может потерять флуоресценцию под ультрафиолетовым светом, если культуры кратковременно оставлены при комнатной температуре. После повторной инкубации пластинок флуоресценция появляется снова.

На образование пигмента может влиять тип пептона, использованного в основе среды. Некоторые штаммы Pseudomonas aeruginosa не образуют пиоцианин. Другие виды Pseudomonas не образуют пиоцианин, но флуоресцируют под ультрафиолетовым светом. Большинство видов, не относящихся к Pseudomonas, подавляется на цетримидном агаре, однако некоторые виды Pseudomonas также могут ингибироваться.

Некоторые нефементирующие микроорганизмы и аэробные спорообразующие бактерии могут образовывать на этой среде водорастворимую окраску от жёлто-коричневой до бурой. Serratia может образовывать розовую пигментацию.

Для подтверждения результата необходимо выполнить биохимические тесты и серологические процедуры.

Методика проведения анализа

1. Откройте крышку и аккуратно поднимите подготовленную пластинку с питательной средой, не касаясь поверхности агара руками.
2. Приложите поверхность агара к исследуемой поверхности.
3. Осторожно прижмите пластинку вручную на срок до 10 с.
4. Обеспечьте постоянное равномерное давление по всей поверхности пластинки: 25 г/см² в течение 10 с.
5. Установите экспонированную пластинку с питательной средой обратно в основание.
6. Закройте крышку.
7. Нажмите на боковые стороны крышки, чтобы убедиться в её фиксации в пазах.
8. Продезинфицируйте поверхность, с которой был взят образец, чтобы удалить возможные остатки агара.
9. Инкубируйте пластинки при установленной температуре.
10. После инкубации, выполненной в соответствии с рекомендованным режимом, подсчитайте количество колоний, выросших на поверхности среды.

Альтернативные способы инокуляции

Пластинки можно использовать как:

• культуральную пластинку;
• пластинку для внесения разведённой пробы;
• пластинку для посева тампоном;
• пластинку для осаждения микроорганизмов под действием силы тяжести.

Подготовка образца и выделение Pseudomonas aeruginosa

Для выделения Pseudomonas aeruginosa пластинки с агаром с цетримидом рекомендуется инокулировать из неселективной среды:

• сердечно-мозгового бульона (M210);
• соево-казеинового переварного бульона (M011).

При высокой концентрации микроорганизмов исследуемый образец можно непосредственно инокулировать на агар с цетримидом (M024).

Состав и характеристики среды

Состав среды, г/л:

Формула среды скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных параметров эффективности.

Конструкция и характеристики бакпечаток

• Форма пластинки: круглая.
• Диаметр пластинки: 55 мм.
• Объём геля в пластинке: 9 мл.
• Внешний вид среды: светло-янтарный плотный гель.
• Стерильность среды: стерильная.
• Материал и конструкция: гибкая одноразовая пластинка с подготовленной питательной средой.
• Основание: с нанесённой сетчатой разметкой с шагом 1 см².
• Контейнер: эластичный, с крышкой и выступающими частями для удобства манипуляций.
• Стерилизация: облучение.
• Упаковка: