HiMedia FL014-50PT HiTouch FlexiPlate - CT (50 шт.)

Готовая селективная питательная среда HiMedia FL014-50PT HiTouch FlexiPlate - CT (50 шт.) в гибкой стерильной пластиковой чашке диаметром 55 мм предназначена для количественного определения Pseudomonas aeruginosa. Среда применяется для подсчёта колоний непосредственно на поверхности образца, включая неровные поверхности, с использованием сетки на основании чашки и регистрацией количества колоний на 1 см².

Назначение

HiMedia FL014-50PT HiTouch FlexiPlate - CT предназначена для выявления и количественного определения Pseudomonas aeruginosa методом контактного нанесения гибкой питательной среды на исследуемую поверхность.

Области применения:

• пищевая промышленность;
• фармацевтическое производство;
• косметическая промышленность;
• молочная промышленность;
• медицинские учреждения;
• водоподготовка и водоочистка;
• экологический контроль;
• исследование косметических средств;
• исследование клинических образцов;
• оценка эффективности дезинфицирующих средств в отношении Pseudomonas aeruginosa.

Гибкая конструкция чашки обеспечивает плотный контакт с неровными поверхностями. Сетка на основании чашки позволяет непосредственно считывать количество колоний на 1 см².

Состав

Формула скорректирована и стандартизирована в соответствии с установленными параметрами эффективности.

Принцип действия и интерпретация результатов

HiTouch FlexiPlate представляет собой готовую к применению стерильную питательную среду в гибкой одноразовой пластиковой чашке диаметром 55 мм. Основание чашки имеет нанесённую сетку, а сама чашка обработана излучением для обеспечения стерильности. Среду асептически заливают в чашку, после чего каждую чашку упаковывают в предварительно стерилизованный пластиковый пакет и дополнительно помещают в пластиковую упаковку.

Питательная формула HiTouch FlexiPlate предназначена для количественного определения Pseudomonas. Цетримид обеспечивает селективность среды, а сетка позволяет непосредственно подсчитывать колонии на поверхности чашки.

Pseudomonas aeruginosa хорошо растёт на обычных лабораторных средах, однако для специфического выделения микроорганизма из объектов окружающей среды, а также образцов человеческого, животного или растительного происхождения используют среду, содержащую селективный агент и компоненты, усиливающие образование пигмента.

Большинство селективных сред основано на природной устойчивости микроорганизмов к различным антибактериальным веществам. Цетримид подавляет рост многих микроорганизмов, одновременно позволяя Pseudomonas aeruginosa формировать типичные колонии. Цетримид является четвертичной аммониевой солью и действует как катионное поверхностно-активное вещество: снижает поверхностное натяжение в месте контакта, а также оказывает осаждающее, комплексообразующее и денатурирующее воздействие на белки бактериальной мембраны. Цетримид подавляет широкий спектр микроорганизмов, включая виды Pseudomonas, отличные от Pseudomonas aeruginosa.

Среда A, разработанная King и соавторами, предназначена для усиления образования пиоцианина Pseudomonas (1). Цетримид-агар, разработанный Lowburry (2), представляет собой модификацию технического агара — среды A — с добавлением 0,1 % цетриимида для селективного выделения P. aeruginosa. После появления высокоочищенного цетриимида его концентрацию в среде снизили (3).

Инкубацию проводят при 37 °C в течение 18–24 ч (4). P. aeruginosa можно идентифицировать по характерному образованию пиоцианина — синего водорастворимого нефлуоресцирующего феназинового пигмента, а также по морфологии колоний и характерному виноградоподобному запаху аминоацетофенона (5). P. aeruginosa является единственным известным видом рода Pseudomonas и грамотрицательным杆овидным микроорганизмом, выделяющим пиоцианин.

Эти среды имеют значение для идентификации P. aeruginosa. Другие виды Pseudomonas не образуют пиоцианин, но флуоресцируют в ультрафиолетовом свете. Большинство непсевдомонад подавляется на цетримид-агаре, однако некоторые виды Pseudomonas также могут подавляться. Некоторые неферментирующие микроорганизмы и аэробные спорообразующие бактерии могут образовывать на этой среде водорастворимую окраску от желтовато-коричневой до коричневой. Serratia может образовывать розовую окраску (3).

Флуоресценцию оценивают при 250 нм. Колонии, демонстрирующие флуоресценцию при 250 нм и сине-зелёную пигментацию, считают предположительно положительными. При кратковременном нахождении культур при комнатной температуре P. aeruginosa может терять флуоресценцию в ультрафиолетовом свете; после повторной инкубации чашек флуоресценция появляется вновь (4).

На образование пигмента может влиять тип пептона, используемого в основе среды (4, 10). Некоторые штаммы P. aeruginosa не образуют пиоцианин. Для подтверждения результатов следует выполнить биохимические и серологические исследования.

Панкреатический перевар желатина обеспечивает P. aeruginosa необходимыми питательными веществами. Хлорид натрия поддерживает осмотическое равновесие среды. Хлорид магния и сульфат калия стимулируют образование пиоцианина (9).

Методика проведения анализа

1. Откройте крышку и осторожно поднимите находящуюся внутри подготовленную чашку со средой, не касаясь поверхности агара руками.
2. Прижмите поверхность агаровой чашки к исследуемой поверхности.
3. Осторожно прижмите чашку вручную на срок до 10 с. Обеспечьте постоянное и равномерное давление на всю поверхность чашки: 25 г/см² в течение 10 с.
4. Верните чашку с экспонированной средой в основание.
5. Закройте крышку.
6. Прижмите боковые стороны крышки, чтобы убедиться, что крышка зафиксирована в пазах.
7. Продезинфицируйте поверхность, с которой был взят образец, чтобы удалить возможные остатки агара.
8. Инкубируйте чашки при заданной температуре.
9. После инкубации в соответствии с рекомендованными условиями подсчитайте количество колоний, выросших на поверхности среды.

Альтернативные способы внесения образца

HiTouch FlexiPlate можно использовать в следующих режимах:

• как культуральную чашку (ii);
• как чашку для разведения образца (iii);
• как чашку для нанесения образца тампоном (iv);
• как чашку для осаждения микроорганизмов из воздуха под действием силы тяжести (v).

Подготовка образца для выделения P. aeruginosa

Для выделения P. aeruginosa чашки с цетримид-агаром следует инокулировать из неселективной среды, например из бульона мозгово-сердечной инфузии (M210) или соево-казеиновой питательной среды (M011). При высокой концентрации микроорганизмов исследуемый образец можно непосредственно инокулировать на цетримид-агар.

Контроль качества

Внешний вид

Стерильная пластиковая чашка, содержащая плотный гель светло-жёлтого цвета.

Количество среды

Количество геля в пластиковой чашке: 9 мл.

Реакция среды

pH: 7,00–7,40.

Испытание на стерильность

Соответствует критериям выпуска.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивают после инкубации при 35 °C в течение 18–24 ч.

Технические характеристики

• Тип изделия: готовая питательная среда.
• Назначение изделия: среда.
• Целевой микроорганизм: Pseudomonas aeruginosa.
• Форма выпуска: гибкая одноразовая пластиковая чашка.
• Диаметр чашки: 55 мм.
• Количество среды: 9 мл геля в чашке.
• Внешний вид среды: плотный гель светло-жёлтого цвета.
• Конечный pH при 25 °C: 7,2 ± 0,2.
• Диапазон реакции среды по контролю качества: 7,00–7,40.
• Селективный компонент: цетримид.
• Сетка на основании: имеется.
• Стерильность: стерильная; испытание на стерильность соответствует критериям выпуска.